VÉRKENET: JELLEMZŐK, TÍPUSOK, TECHNIKÁK ÉS SZÖVETTAN - BIOLÓGIA - 2024

A vérkenet perifériás vérkenet, amelyet a vérkeringésben lévő komponensek elemzésére használnak. A vérkenet megfigyelése olyan hematológiai adatokat szolgáltat, amelyek nagyon hasznosak számos patológia diagnosztizálásában és nyomon követésében.

A vérkenet lehetővé teszi a különféle típusú fehérvérsejtek számának meghatározását (leukocita formula), valamint az eritrociták, a leukociták és a vérlemezkék morfológiájának és alakjának elemzését.

A vérkenet készítése. Forrás: Vér laboratóriumi üvegben. Public DomainPictures.net

Ebben a sejtek számának rendellenességeit lehet kimutatni, mint például: leukocitózis vagy leukopénia, lymphocytosis vagy lymphopenia, neutrophilia vagy neutropenia, thrombocytosis vagy thrombocytopenias és eosinophilia. A sejtek méret- és alakváltozásai szintén megjelenhetnek.

Ezenkívül különféle típusú anémiák, leukémiák és bakteriális vagy vérparazita fertőzések is kimutathatók.

Ehhez különféle típusú kenet létezik, amelyet a vizsgálat céljától függően végeznek. Vannak vékony és vastag kenet. Ezek a kenetek eltérnek a végrehajtási technikától és a vizsgálat céljától.

Finom cseppekkel járó kiegészítőket használnak a teljes hematológia kialakításához. Ez a leukocita-összetételre vonatkozó adatokat szolgáltat a vért alkotó három sejt-sorozat alakjának és morfológiájának elemzése mellett: vörös sorozat, fehér sorozat és vérlemezkék. Bár ezek kiegészítik a vastag vérréteg vizsgálatát is.

A vastag fóliát olyan hemoparasiták által okozott betegségek diagnosztizálására használják, mint pl. Malária vagy malária, toxoplazmózis, leishmaniasis, Chagas-kór, babesiosis és microfilariasis.

A vérkenet jellemzői

A jó vérkenetnek meg kell felelnie bizonyos tulajdonságoknak. Közülük megemlíthetjük:

-A mintának meg kell felelnie a reprezentatív minimum minőségi követelményeknek.

-A mintavételt jól végrehajtani kell.

-A kenet időben történő végrehajtása.

- Ha vénás vérrel végezzük, használjunk olyan véralvadásgátlót, amely nem deformálja a sejteket, és keverjük össze a csövet a kenet elkészítése előtt.

-Ha kapilláris vérrel megtörténik, dobja el az első cseppet.

-A terjedésnek homogénnek kell lennie. Ez biztosítja a sejtek egyenletes eloszlását és a vérsejtek alaki és számának megfelelő elemzését.

-A kenet oldalának simának kell lennie az elejétől a végéig.

-A kenetnek meg kell felelnie a tárgylemez oldalától 1–2 mm távolságra.

-A kenetréteg vastagságának fokozatosan csökkennie kell az elejétől a végéig (finom cseppkenéssel kell bekenni a csúszó módszerrel).

-A minták összetévesztésének elkerülése érdekében megfelelően fel kell címkézni.

- Helyezze fel és festje meg megfelelően a vér elem egyértelmű megfigyeléséhez.

- Hagyja a kenet nagyon jól kiszáradni, mielőtt a készítményt mikroszkóp alá helyezné. Az merítőolaj nedves kenetre helyezése olyan micellák képződését okozza, amelyek megakadályozzák a sejtek látását.

A vérkenet típusai

A perifériás vérkenet vékony és vastag kenetre osztható. A vékony réteggel rendelkezőket a leukocita-formula tanulmányozására és a vérsejtek morfológiai megfigyelésére használják. Extracelluláris baktériumok, például borrelia és intracelluláris hemoparazitok, például plazmodium is láthatóak.

A finom blobban a parazita fajai azonosíthatók, tehát sokkal specifikusabb módszer, mint a vastag blob, azonban a vastag blob érzékenyebb, mivel koncentrálási technika az extracelluláris hemoparasiták kimerítő keresésére.

Kétféle finom csepp kenet létezik: a mikroszkóp diákon és a fedőlemezeken. A vastag keneteket diákon végezzük.

Vérminták vételi módszerei

Vérkenet kapilláris punkcióból vagy antikoagulánsmal vett vénás mintából készülhet. Ha vérből véralvadásgátló anyagból készül, akkor a kenet elkészíthető a minta vétele után 2 órával.

Óvatosan kell eljárni olyan véralvadásgátlókkal, amelyek nem deformálják a vérsejteket. A legjobb megoldás az EDTA. Ellenkezőleg, antikoagulánsok, például trinátrium-citrát alkalmazását kerülni kell.

Ha a mintát kapilláris punkcióval veszik, a kenetét azonnal meg kell hosszabbítani, mielőtt a vérrög képződik.

Az első cseppet el kell dobni, hogy a következő csepp spontán módon kiszabadulhasson, hogy elkerüljük a minta hígítását a szövetfolyadékkal. Ez a leginkább ajánlott módszer a sejtek morfológiájának megfigyelésére, mivel a vér nem tartalmaz semmilyen adalékanyagot.

A hemoparaziták megfigyelésére Solari és munkatársai kutatási munkájukban arra a következtetésre jutottak, hogy mindkét technika (venopuncture és kapilláris) egyaránt hatékony.

A vérminta típusai: A. Kapilláris punkció. B. Vénás punkció. Forrás: A. Flickr.com B. Pxhere.com

A vérkenet elkészítésének technikái

A vérkenet kézzel is elvégezhető mikroszkóp lemezeken vagy fedőlapon vagy lemezen. Automatizált berendezésekkel is lehetséges.

- A diák kenet

Ez a módszer a legtöbb laboratórium számára előnyös, könnyebb kezelhetősége miatt.

Pasteur pipettával tegyen egy nem túl vastag vagy nagyon finom vércseppet a tiszta tárgylemez egyik végének közepére.

A kenet egy másik talajcsúszda segítségével készül. A csiszolt üvegtáblát merőlegesen helyezzük el annak a másik végének, ahol a csepp található.

30–45 ° közötti szögre esik és a csepp felé csúszik; Ha megérinti, akkor lineárisan kinyúlik a talajcsúszda szélén, állandó és meghatározott mozgással a lap visszatér; mielőtt elérné a csúszkát, felemelkedik.

Ilyen módon egy homogén réteget eloszlatunk a fogadó csúszda felületén.

A kenet hagyja megszáradni. Ezután rögzítjük és megfestjük a kívánt festékkel. A mikroszkóp alatt történő megtekintés előtt hagyja jól megszáradni. Egy csepp olajat helyezünk az arcra, amelyen látható a kenet, és megfigyeljük egy fénymikroszkóp alatt.

Vérkenet a dián. Felső kép: festetlen kenet. Alsó kép: festett kenet. Forrás: Coinmac

A diákra készített kenet részei

Az ilyen típusú kenetben három meghatározott terület különböztethető meg: a fej, a test és a farok. A fej azon területnek felel meg, ahol a kenet kezdődik, ez a vastagabb terület, és nem jó megfigyelni.

A test a kenet központi vagy közbenső része, ez a legjobb terület mikroszkóp alatt megfigyelni, mivel ott a sejtek egyenletesen oszlanak el és morfológiájuk megmarad.

A farok megfelel a kenet utolsó részének; itt az eloszlás már nem egységes, és az eritrociták morfológiája hajlamos elveszni.

Minőségellenőrzés a csúszótechnikában

Ebben a technikában alapvető szerepet játszik:

- A tárgylemez tisztítása és zsírtalanítása: garantálja a minta jó csúszását.

- A csepp mérete: Nagyon nagy cseppeknél vastagabb és hosszabb kenet érhető el, nagyon kis csepp esetén a szórás rövidebb és rendkívül finom.

-A kiterjesztésben alkalmazott sebesség: minél kisebb a sebesség, annál vékonyabb lesz a kenet, annál nagyobb a sebesség, annál vastagabb.

-Végrehajtási szög: minél kisebb a szög, annál finomabb a kenet, annál nagyobb a szög, annál vastagabb.

-Lépjen a fedőlapra

Nem széles körben használják, mivel a törékeny fedőrétegek kezelése nehézkes, azonban nagy előnyeket kínál, mivel a sejtek jobb eloszlása ​​érhető el az egész kenetben.

Egy nem túl vastag, nem túl finom csepp kerül a fedőlap közepére. Azonnal újabb takarólemezt helyeznek rá a tetejére oly módon, hogy mindkét takarócsúcs hegye kinyúlik, csillagot képezve.

A csepp spontán módon elterjed a két fedőcsík felületén. A kiterjesztés végén mindegyik diát gyorsan elcsúsztatják egymás ellenkező oldalára (egyet jobbra és a másik balra).

A technika két kenetet biztosít egy helyett.

Szárazra helyezzük őket a szóróoldattal felfelé. Miután megszáradt, rögzítjük és megfestjük a választott technikával. Hagyja megszáradni. Egy csepp merülőolajat helyezünk a tárgylemezre, a kenetét a kenet oldalával lefelé helyezzük, és mikroszkóp alatt megnézjük.

Minőség-ellenőrzés a fedőcsúcs technikaban

Ahhoz, hogy ehhez a technikához jó kenet legyen, fontos:

-A takarólemezek tisztítása (segít a minta simán csúszni).

-A csepp mérete (befolyásolja a kenet vastagságát).

-A sebesség, amellyel a takarólemezeket elválasztják (befolyásolja a szórás homogenitását).

-Automatizált berendezésekkel

Meg lehet csinálni ezen a csapaton keresztül: Spinner és Autoslide.

A Spinner abból áll, hogy egy csepp vért egy diára helyezünk egy speciális centrifugalemezre. A mintát nagy sebességgel centrifugálják; ily módon a minta homogén és finom kenet képződik. Ennek hátránya a minta hemolízisének lehetősége.

Az Autoslide olyan eszköz, amely mechanikusan végrehajtja a mozdulatokat a diák kenetének végrehajtására. A kenet is rögzíthető és megfesthető. Még néhány automatikus hematológiai számlálóhoz is adaptálható.

Vastag kenet-technika

A hemoparaziták kereséséhez két kenet javasolt: az egyik finom csepp és egy vastag csepp.

Végezzen el egy kapilláris punkciót, tisztítsa meg az első cseppet. Helyezzen finom cseppet a tárgylemezre, és kenje meg az előzőekben leírtak szerint. A vastag gyöngyhöz helyezzen egy nagy gyöngyöt egy másik tárgylemezre és terjessze egy 1,55 mm-es négyzetbe. Hagyja, hogy a két kenet megszáradjon.

Kenetfestés

Finom cseppekhez többek között a Giemsa vagy Wright foltok is felhasználhatók. Giemsa vagy May-Grunwald Giemsa festék ajánlott vastag kenet esetén.

Giemsa folt

A kenet metanollal 3 percig rögzítve van, kiszűrjük és hagyjuk ismét megszáradni. A kenet ezután Giemsa-folttal borítva 10-15 percig. Desztillált vízzel mossuk, és hagyjuk megszáradni. A mikroszkóp alatt történő megfigyeléshez csepp merülőolajat helyezzünk.

Wright foltja

A kenetet Wright folttal fedjük le 5 percig. Dobjuk el és helyezzük a pufferoldatot 6,8 pH-ra 6 percre. Fújja át a készítményt a homogenizáláshoz. Mossuk desztillált vízzel, és hagyjuk megszáradni. Figyelje meg a mikroszkóp alatt.

A hibás kenet típusai

A diákokkal végzett finom csepp technikában gyakornokokban fordul elő.

Kenetek különböző vastagságú területeken (vékony és vastag metszetben)

Ennek oka az, hogy a végrehajtott mozgás nem volt állandó a szórás alatt, megállt és újraindult.

Nagyon rövid kenet kenet

Két oka van: az egyik annak a ténynek köszönhető, hogy a talajcsúszdát megemelték, mielőtt elérte volna a csúszó másik végét. Ebben az esetben rendkívül vastag és rövid.

Másrészt, ha a kenet rövid, de vékony, az azért van, mert a csepp mérete nagyon kicsi volt.

A kenet végén a fogazott területtel

Ennek több oka van: az egyik az, hogy a talajszél hibás, hogy a fogadó tolóra kifejtett nyomás növekszik a szórás idején, vagy hogy a tárgy talajának széle kopott.

Kenet vákuumképződéssel vagy tiszta, kerek vagy elliptikus területeken

Ennek oka a zsíros kenőcsök használata (rosszul mosott és zsírtalanított).

Nagyon vastag vagy nagyon vékony kenet

A túl nagy cseppek nagyon vastag kenetet eredményeznek az elejétől a végéig, a nagyon kis cseppek pedig nagyon finom keneteket eredményeznek.

Szövettan

A vérsejtek vérkenetben láthatók. Közülük a következők:

- Vörösvértestek vagy vörösvértestek

Emberi vér, vörösvértestek vagy vörösvértestek és két fehérvérsejt. Felvétel és szerkesztés: Viascos: Az Ön megfigyelése rendkívül fontos. Ezen a szinten anémiák, talasémia, csontvelő-betegség stb. Kimutathatók.

Az eritrociták száma vagy a vörös vérsejtek körülbelül 5 x 10 ⁶ mm3 férfiakban és 4,5 x 10 ⁶ nőknél. A vörösvértestek mindkét oldalán konkáv korong alakúak, központi fiziológiás sávban. Ezek külön-külön láthatók (normál) vagy rouleaux halmokat képeznek (rendellenes).

A kenetben poikilocitózis (különböző alakú vörösvértestek), anizocitózis (különböző méretű vörösvértestek), anizopoikilocitózis (különböző alakú és méretű), anizokrómia (különböző színű), eritroblasztok (éretlen vörösvértestek), mikrocitózis (kisebb vörösvértestek) jelenik meg.) és makrociták (nagyobb vörösvértestek).

Amikor hiányzik a hemoglobin mennyisége és a központi halványképesség növekszik, azt mondják, hogy hypochromia van. Ha egy normál vörös sorozatot figyelnek meg, akkor normocytikusnak és normokromatikusnak kell jelenteni.

-Fehér vérsejtek vagy leukociták

fehérvérsejtek

A normál mennyiség 5000 és 10 000 mm ^{3 között van}. Megváltoznak fertőző folyamatokban, allergiákban és leukémiában. A vérkenetben különféle típusok különböztethetők meg, amelyeket az alábbiakban ismertetünk.

Szegmentált neutrofilek

Ezek a teljes leukociták 55-65% -át képviselik. Mérnek 10-15 μm között. Van egy szegmentált vagy lebenyített atommag, amely különböző morfológiákat vesz át, ezért polimorfonukleárisnak nevezik.

Bőséges neutrofil szemcsék vannak a citoplazmában és néhány azurofil. Növekszik a bakteriális fertőzésekben (neutrophilia), csökken a vírusos fertőzésekben (neutropenia).

Morfológiai rendellenességek, például pleokariocitózis (hiper-szegmentált magok), ívek (éretlen sejtek) vagy makropolitikák (ovális alakú és nagy) megfigyelhetők.

Egyéb módosítások:

- Toxikus granulációk

-Pseudo Pelger neutrofilek (a sejtmagban nem fordul elő lobuláció, vagy bilobálódnak).

-Döhle testek: sötétkék citoplazmatikus zárványok.

-Növekedett citoplazmás basophilia.

- Iratíratlan plazmás vákuumok.

-Cellularis piknózis (a magok közötti hidak elvesztése).

Szegmentált eozinofilek

Ezek a teljes fehérvérsejtek 1-3% -át képviselik. Mértek 9-10 μm. Ezeket bőséges acidofil citoplazmatikus granulátum és kevés azurofil jelenléte jellemzi. Magjának két lobulációja van. Számuk növekszik az allergiában és a parazita eredetű betegségekben.

Szegmentált basofilek

Rendkívül ritkák, a leukociták 0-1% -át képviselik. Mérnek 10-12μm. A sejtmag általában szabálytalan a határok között, és elhalványulhat, de ez nem látható, mivel a citoplazmában nagyszámú durva bazofil granulátum van. Nagyon ritkán fordul elő bazofília.

A limfociták

Kis sejtek, basofil citoplazmával, jól meghatározott, kerek maggal, kondenzált kromatinnal. A mag magában foglalja majdnem az egész sejtet. Ezek a vér leukocitáinak 26–40% -át képviselik. Növekszik a vírusos fertőzésekben (lymphocytosis). Reaktív limfociták láthatók.

A monociták

A limfocitákon nagyobb sejtek, nagyobb citoplazmával és lazább, ovális kromatin magokkal. Mérnek 9-12μm. A citoplazma bőséges és általában halvány szürkéskéknek tűnik, a standard festési technikákkal. A változások között vákuumzott monociták és monocitózis figyelhető meg.

-Platelets

Mérete 1,5-3 μm. Alakja kerek vagy ovális. A normál érték 150 000 és 350 000 vérlemezkék / mm3 között van. Néhány vírusfertőzésben csökkent. Nincsenek magvaik és lila színűek. Rendellenességek jelenhetnek meg ebben a sorozatban, például makro- vagy mikrolemezkék, trombocitózis vagy trombocitopénia és vérlemezke-fragmentumok.

Patológiai elemek

Vérparaziták

Hemoparaziták, például a malária vagy a malária kórokozója (a Plasmodium nemzetség parazitái), a vérkenetben láthatók. Ezért fontos, hogy a kenet manuális elemzése megtörténjen, mivel az automata berendezések hiányzik erről a megállapításról.

baktériumok

Olyan patológiákban, mint például a relapszív láz vagy a Lyme-kór, megfigyelhető annak kórokozója. Ebben az esetben a Borrelia recurrenti spirochetes és a Borrelia burgdorferi felel meg a vérkenetben.

Éretlen sejtek

Súlyos eseteket lehet megfigyelni többek között leukémiákban, leukemoid reakciókban és leukoerythroblasztikus reakciókban. Bakteriális fertőzések esetén balról kissé eltérhetnek (görcsök jelenléte). Az eritroblasztok bizonyos anémiákban is megjelenhetnek.

Irodalom

1. Vér és vérképző szövetek. Elérhető a következő címen: sld.cu
2. Gomez A, Casas M. 2014. Angel. Klinikai laboratóriumi értelmezés. 8. kiadás. Szerkesztő Médica Panamericana.
3. Solari Soto L, Soto Tarazona A, Mendoza Requena D, Llanos számlák A. A vastag vénás vércsepp parazita sűrűségének összehasonlítása az akupresszúrával a malária vivax diagnosztizálásánál. Rev Med Hered 2002; 13 (4): 140-143. Elérhető a scielo.org oldalon.
4. Terry Leonard Nelson, Mendoza Hernández Carlos. A perifériás vérkenet vizsgálatának fontossága időskorban. Medisur 2017; 15 (3): 362-382. Elérhető a következő címen: scielo.sld
5. Grinspan S. A perifériás vérkenet vizsgálata. Orvosi továbbképzés. Elérhető a következő címen: bvs.hn/RMH