VÉRTENYÉSZET: MI AZ, INDOKLÁS, ELJÁRÁS, EREDMÉNYEK - BIOLÓGIA - 2025

A vér a kultúra egy bakteriológiai vizsgálat, amely arra törekszik, hogy észleli a mikroorganizmusok jelenléte a vérben. A vér természeténél fogva folyadék, ezért élettani körülmények között kell tartani, így a baktériumok vagy gombák jelenléte a vérben mindig kóros.

Ha baktériumokat vagy gombákat találnak a vérben, de a szaporodás nem haladja meg a mikroorganizmusok immunrendszer általi eliminációját, akkor bakteremiának (baktériumok esetén) vagy fungemianak (gombák esetében) nevezik; De ha a mikroorganizmusok száma ellenőrizhetetlenül növekszik, úgy nevezik septicemia.

Vértenyésztő palackok (sárga: gyermek aerobiosis, zöld: felnőtt aerobiosis és piros: felnőtt anaerobiosis). Forrás: a fotó készítette az MSc Marielsa Gil.

A bakteriémia, a fungemia és a septicemia veszélyezteti a beteg életét, ezért azokat azonnal kezelni kell. Ezért, amikor a vérben való fertőzés gyanúja merül fel, az orvosok vértenyésztési vizsgálatot kérnek.

Ez a bakteriológiai elemzés lehetővé teszi annak megállapítását, hogy van-e fertőzés a vérben, és melyik a mikroorganizmus. Ezen felül, ha ez pozitív, érzékenységi tesztet hajtanak végre annak megállapítása érdekében, hogy melyik antibiotikumok vagy gombaellenes szerek alkalmazhatók a kezelésben.

Ha viszont a vértenyészet 24 órás inkubációkor negatív, akkor azt csak akkor szabad dobni, ha eléri a 240 órás negatív értéket. Ez biztosítja, hogy nincsenek lassan növekvő mikroorganizmusok.

A vértenyészet megbízhatósága szempontjából szélsőséges aszeptikus intézkedéseket kell hozni a minta vételekor, és a teszt megbízhatóságának és érzékenységének növelése érdekében legalább két mintát kell venni a láz csúcspontja alatt vagy annak közelében.

Mire való?

A vér egy steril folyadék, és ha mikroorganizmusok találhatók benne, akkor 100% -ban patológiás. Ez a helyzet egy nagyon finom klinikai képet képvisel, amely veszélyezteti a beteg életét.

A vértenyésztés fontos bakteriológiai teszt, amely kimutatja a mikroorganizmusok jelenlétét a véráramban.

A mikroorganizmusok különböző módon juthatnak el a vérbe, amelyek extravaszkuláris fertőzések lehetnek, például: tüdőgyulladás, intraabdominális fertőzések, pyelonephritis, többek között a bőr, a lágy szövetek vagy az ízületi gyulladás súlyos fertőzései.

Vagy lehet intravénásan, például intravénás vagy artériás katéterek szennyeződése, endokarditisz, intravénás kábítószer-függőség, szennyezett gyógyszerek vagy oldatok beadása stb.

A szepszis okozójának időben történő felismerése és kezelése elengedhetetlen a beteg túlélésének biztosításához.

Ebben az értelemben az orvosnak jeleznie kell a vérkultúra megvalósulását, amikor olyan jeleket és tüneteket észlel, amelyek septikémia gyanúját kelti, például: láz (38 ° C felett) látszólagos fertőző fókusz nélkül, vagy éppen ellenkezőleg, hipotermia (<de 36 ° C).

Egyéb tünetek lehetnek: hidegrázás, a fehérvérsejtszám növekedése (> 10 000 sejt / mm ³) vagy a polimorfonukleáris sejtek szignifikáns csökkenése (<1000 PMN / mm ³). Csakúgy, mint a többszervi romlás vagy a vitalitás hirtelen vesztesége, többek között a figyelmeztető jelek.

A bakteriémia lehet állandó, átmeneti vagy időszakos. Ez fontos a minta vételekor, mivel akkor kell venni, amikor nagyobb a valószínűsége, hogy a mikroorganizmus kering.

Ezért ajánlott legalább 2 mintát venni különböző helyekről. Ezen túlmenően az az ideális, ha a mintát lázas csúcsokon veszik, vagy amikor a beteg remegéses, szélsőséges hipotermia, izzadás vagy tachikardia jelentkezik.

Ahhoz azonban, hogy a vértenyésztés valóban hasznos eszköz legyen, a mintát rendkívül óvatosan kell venni. A minta bevételének pillanatában bekövetkezett rossz manipuláció vagy rossz aszeptika érvénytelenítheti a tesztet, és hamis pozitív eredményt kaphat.

bázis

A vizsgálat során két vagy három vérmintát veszünk aszeptikusan és speciális palackokba helyezzük.

A vérminták tenyésztésére szolgáló speciális eszközöket vértenyésztő palackoknak nevezzük. Ezeket az alábbiak szerint osztályozzák:

A beteg kora szerint

-Gyermekgyógyászati ​​alkalmazás

-Felnőtteknek.

A mikroorganizmus típusa szerint

-Lombik aerob mikroorganizmusokhoz (aerob baktériumok, fakultatív baktériumok és gombák).

- Vérvíz-tenyésztő palackok anaerob mikroorganizmusokhoz (szigorú anaerob baktériumok).

Néhány folyékony tápközeget, mások szilárd és folyékony tápközeget tartalmaznak egyszerre. Aktívszén-részecskékkel is léteznek.

Folyamat

Ajánlások mintavételhez

- A mintát a mikrobiológia területén magasan képzett és képzett személyzet veszi.

- A asepszis vagy a mintavételi hely alapos tisztítása kétségtelenül a legfontosabb lépés.

- Mint minden más mintavételnél, az egészségügyi személyzetnek teljes egészében be kell tartania a biológiai biztonsági intézkedéseket a folyamat során (többek között kesztyű, köntös, szemüveg használata).

- Ügyeljen arra, hogy a mintavételhez szükséges összes eszköz rendelkezésre álljon.

- Címkézze fel az injekciós üvegeket a beteg teljes nevével, dátumával, orvosi nyilvántartási számával, a minta begyűjtésének idejével és a laboratóriumi sorszámmal.

-Az ideális, ha mintát vesz, mielőtt a beteg megkezdi az antimikrobiális terápiát. Csak abban az esetben jelzik, hogy gyanúja merül fel a folyamatban lévő kezelés működésének hiányosságáról. Ebben az esetben a mintát a gyógyszercsere előtt kell venni, az antibiotikum-gátlókkal (aktívszén-részecskékkel) ellátott vértenyésztő palackok segítségével.

- Legalább 2 mintát kell venni különböző anatómiai helyeken, például a jobb karban és a bal karban. Endocarditis gyanúja esetén 3 minta ajánlott. Mindegyik mintába két palack kerül (az aerobiosis és az anaerobiosis esetében).

Mintamennyiség

A minta mennyisége a beteg életkorától függ, de az 1: 5 és 1:10 arányt mindig meg kell tartani a vér / tenyészleves hígítás szempontjából.

Újszülötteknél az ajánlott mintavétel ampullánként 1 ml vér. Gyerek palackot használnak.

Egy hónap és egy év közötti csecsemők esetében ez 1,5 ml vérre emelhető üvegben. Gyerek palackot használnak.

2 évesnél idősebb gyermekek esetén a megfelelő mintamennyiség üvegbenként 2,5 ml vért tartalmaz. Gyerek palackot használnak.

A serdülőkorától kezdve palackonként 5-10 ml közötti vérmennyiséget lehet növelni. Felnőtt üveget használnak.

Végül, felnőttkorban, a szükséges mennyiség palackonként 8-10 ml. Felnőtt üveget használnak.

Mintavétel

- A vérmintája lehet vénás vagy artériás. Az artériás vért azonban csak akkor veszik, ha a vénás mintavétel lehetetlen.

- Nem ajánlott mintát venni egy központi vénás katétrából, kivéve ha:

1. Lehetetlen a perifériás (vénás vagy artériás) mintát venni.
2. Vérzésveszélyes betegek.
3. Amikor az orvos bakteriémia gyanúja miatt a központi vénás katéter szennyeződése miatt.
4. Amikor a láz 4-5 napos lázas abbahagyása után ismét megjelenik, függetlenül attól, hogy a beteg antimikrobiális kezelést kap-e vagy sem.

Asepsis a mintavétel előtt

- Válassza ki a mintavételhez szükséges anatómiai helyeket. Általában a legjobb kaliberű vénákat választják (bazilikus vagy cephalicus vénák).

- Az Atlanta (USA) betegségvédelmi központja (CDC) szerint a kezelőnek kesztyű viselése mellett a mintavétel előtt mosson kezet 2% klórhexidinnel vagy 10% povidon jóddal.

-Ossza be és keresse meg a használni kívánt vénát.

- Tisztítsa meg a punkciós területet forgó módon, mozogva a közepétől kifelé szappanos klórheksidinnel vagy antiszeptikus szappannal. Öblítsük le steril sóoldattal.

Ezt követően alkalmazzon fertőtlenítőszert, és hagyja, hogy működjön. Példa 0,5% klórhexidin-glükonát 1 perc alatt vagy 10% povidon jód 2 percig. Ez utóbbi esetében először kérdezze meg, hogy a beteg allergiás-e a jódra. Ha allergiás, akkor 70% alkoholt pótolhat.

Mintavétel

- Helyezze a tornyot, hogy fokozza a véráramot és a vénát kihajtja.

- Ne érintse meg ismét az ujjával a szúrás helyét. Ha erre feltétlenül szükség van, az ujját ugyanúgy kell mosni, mint a lyukasztási területet.

- Helyezze be az injekciós tűt vagy a fejbőrt a vénába, és vegye ki a szükséges mennyiségű vért.

- Ne vegyen gyapotot vagy gézt a tűre, amikor eltávolítja, ha az nem steril.

- Nagyon óvatosan, anélkül, hogy megérintette a kupakot, vegye le a palackok biztonsági zárját. Egyes szerzők azt javasolják, hogy a minta oltása előtt fertőtlenítsék a kupakot.

- Osztja el a megfelelő mennyiségű vért az injekciós üvegekben. Ha a mintát injektorral veszik, a szükséges mennyiséget először az anaerob lombikba, majd az aerob lombikba öntik. Ha a felvételt fejbőrrel (pillangóval) végzik, akkor ellentétes módon öntik fel.

- Finoman keverje meg a vértenyésztő palackot fordítva.

- Cserélje ki a kesztyűt, és ismételje meg az előző lépéseket a második mintagyűjtéshez.

-Ha a második mintát más helyről veszik, akkor azonnal meg lehet csinálni, de ha ugyanabból a helyről származik, akkor 30–90 percet kell várnia az egyik minta között.

- A mintát a lehető leghamarabb a laboratóriumba kell vinni, ha ez nem lehetséges, akkor azt szobahőmérsékleten 18 órán keresztül kell hagyni.

Kultúra

Miután a laboratóriumba került, a lombikokat 37 ° C-on inkubálják az egyes lombikok körülményei között, azaz aerobiosis vagy anaerobiosis során.

A kézi módszer szerint a csengetést 24 órás inkubációnál kell elkezdeni, majd napi rendszeren kell csengetni. A gyűrűket a következőképpen hajtjuk végre: először a palack kupakját fertőtlenítjük, és behelyezzük a steril injektor tűjét. A folyadékot extraháljuk a lombikból, és vér-agarra és csokoládé-agarra vetjük.

Növekedés esetén Gram-ot végeznek, szubkultúrákat végeznek speciális tápközegben, biokémiai teszteket és antiiogramot.

Automatizált módszerekkel a Bact / Alert berendezés riasztást bocsát ki, amikor észleli, hogy az ampulla pozitív. Ugyanezen módon meg kell csapni a vér-agarra és a csokoládé-agarra.

Egy másik módszer, amelyet elnyernek, a lombik elemzése 6 órás inkubálás után tömegspektrometriával. Ez a módszer hozzájárult a diagnózis érzékenységének és sebességének növeléséhez.

Eredmények

Mindaddig, amíg a vértenyésztő üveg negatív, előzetes közbenső jelentések adhatók a kezelő orvosnak. A jelentés jelzi, hogy negatív az inkubálás ideje alatt. Például, ha negatívvá válik a negyedik napig, akkor az alábbiak szerint jelenik meg:

Előzetes eredmény: negatív tenyésztés 96 órás inkubálással.

Megjegyzés: a vizsgálat 240 órán át folytatódik.

Ha a vértenyészet pozitív, azonnal értesítik a kezelõ orvost, és jelentést küldenek legalább a kolónia grammjával. Példa:

Előzetes eredmény: a pozitív tenyészetben 48 órás inkubáláskor megfigyelhetők gram-negatív bacillusok és negatív oxidáz. Az azonosítás és az érzékenység tesztelése folyamatban van.

Ez az információ vezet a kezelõ orvostól a lehetséges mikroorganizmusok empirikus terápiájának megkezdéséhez, miközben várja a laboratórium végleges eredményét.

A bakteriológiai vizsgálat befejezése után, azaz a mikroorganizmus azonosítása és az antiiogram rendelkezésre áll, a végleges jelentést a lehető leghamarabb el kell küldeni.

Különös figyelmet kell fordítani, ha a célszervezet a Neisseria gonorrhoeae vagy a Neisseria meningitidis, mivel ezek a baktériumok nagy koncentrációban nátrium-polianetoszulfonát (SPS) jelenlétében gátolhatók.

Ezért ez a vegyület nem haladhatja meg a 0,025% -ot a vértenyésztő palackokban.

Másrészt, ha a vértenyésztési mintát először Vacutainer csövekben veszik, ezekben a csövekben a meningococcusokra és a gonococcusokra mérgező SPS koncentrációk vannak, tehát a vért 1 órán belül át kell vinni a levestenyésztő rendszerbe.

Hogyan lehet megállapítani, hogy a vértenyészet pozitív-e vagy szennyeződés-e?

A vértenyészetet akkor tekintik fertőzöttnek, ha csak egy vértenyésztési üvegben növekszik a vett mennyiség. És a fertőzés gyanúja növekszik, ha az izolált mikroorganizmus egy normál bőr mikrobiota: példa: Koaguláz-negatív Staphylococcus, Propionibacterium spp.

Immunhiányos betegekben azonban nem szabad figyelmen kívül hagyni a mikroorganizmusokat, ebben az esetben a mikroorganizmusnak több mintában meg kell jelennie.

Másrészről, ha ugyanazon mikroorganizmus antibiotikumokkal szembeni érzékenysége azonos, két különféle mintában izolálva, akkor a fertőzés valódi.

Egy másik jellemző a baktériumterhelés, mivel a szennyezett vérkultúrák későn növekednek, míg a kezeletlen betegek valódi fertőzései általában 14 órás inkubációkor pozitívak, amikor a mikroorganizmus nem zavaró.

Másrészről, antimikrobiális szerekkel kezelt betegekben az érintett mikroorganizmus időt vehet igénybe, mert a terhelés nagyon alacsony.

Egynél több mikroorganizmus megjelenése szennyeződésre utalhat, de ha ugyanazt az eredményt megismételik több felvétel különböző helyekről, akkor az valódi.

Irodalom

1. "Vérkultúra." Wikipédia, a szabad enciklopédia. 2019. július 3., 17:28 UTC. 2019. július 14., 19:05 en.wikipedia.org
2. Hervé B. Új technológiák a mikrobiológiai diagnosztikában: automatizálás és néhány alkalmazás a mikrobiális azonosításban és az érzékenység vizsgálatában. Rev. Med. Clin. Számít. 2015-ig; 26 (6) 753-763. Elérhető a következő oldalon: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. 20. fejezet: Szepszis és a szív- és érrendszeri betegségek kockázata. Szív-érrendszeri egészség. 187-194. Elérhető a következő címen: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Vérkultúrák: Mit mondtak neked és mit csinálsz? Beteg glob. 2012-ben; 11 (26): 146-163. Elérhető a következő címen: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. A pozitív vértenyészet megszerzésének valószínűsége. Med. Interna Mex. 2017-re; 33 (1): 28–40. Elérhető a scielo.org oldalon