STUART KÖZEG: ALAPOZÁS, ELŐKÉSZÍTÉS ÉS FELHASZNÁLÁSOK - BIOLÓGIA - 2026

A Stuart táptalaj félszilárd agar vagy tápanyag, tápanyagok nélkül, biológiai minták szállítására. Célja, hogy a mintában lévő törzsek egy ideig ideig életképesek maradjanak, a mikrobiális populáció növekedése nélkül.

1948-ban a Moffet, Young és Stuart készítette, majd később Toshach és Patsula módosították. Nátrium-glicerofoszfátból, nátrium-tioglikolátból, kalcium-kloridból és agar-agarból áll. Ez utóbbi jelen van a félszilárd közegben, és nincs a folyadékban. Egyes laboratóriumok metilénkékből adnak hozzá.

Culturette Stuart szállítással. Forrás: Írta: CDC / Dr. Gilda Jones, jóvoltából: Közegészségügyi Image Library

Általában akkor használják, amikor nem lehetséges a mintát azonnal elvetni. Ebben az esetben a mintát a szállító közegbe helyezik, miközben azt átviszik a laboratóriumba, amely feldolgozza a tenyésztést.

Ily módon garantálható, hogy a mikroorganizmusok életben maradnak, amíg be nem oltják a megfelelő tápközegbe.

Kezdetben húgycső vagy hüvely minták szállítására szánták, ahol a Neisseria gonorrhoeae jelenlétére gyanú merült fel. Később rájöttek, hogy ennek hasznossága szélesebb lehet.

A Stuart táptalaj nagyon hatékonynak bizonyult olyan labilis és igényes mikroorganizmusok megőrzésében, mint például a Neisseria meningitidis, a Haemophilus influenzae, a Streptococcus pyogenes, a Streptococcus pneumoniae, a Corynebacterium diphteriae, a Bordetella pertusis. Más nem-bosszantó mikroorganizmusok, például Enterobaktériumok mellett.

A Stuart táptalaj alapvetően megakadályozza a minta kiszáradását, fenntartja az ozmotikus egyensúlyt és megőrzi a mikroorganizmusokat ideális pH mellett. Másrészt stratégiailag ez a táptalaj nem tartalmaz tápanyagokat, ezáltal megakadályozva a mikroorganizmusok szaporodását.

A piacon vannak speciális minta szállítóeszközök, amelyek tartalmazzák ezt vagy más szállítóeszközt, úgynevezett culturette. A laboratóriumban is elkészíthetők.

bázis

A Stuart szállítási mód célja, hogy a mintákat az eredeti állapotukhoz közel tartsa feldolgozásukig.

A nátrium-glicerofoszfát és a kalcium-klorid pufferrendszer, amely fenntartja a pH-t és az ozmolaritást.

Eközben a nátrium-tioglükolát redukálószerként működik, és agar-tartalom esetén félig szilárd állagot ad, hogy késleltesse a közeg oxigénellátását. Végül a metilénkék egy oxidációs indikátor, azaz az oxigén jelenlétét érzékeli.

A félszilárd közeg redox indikátorral ideális a minták szállításához, ahol feltételezhetően van anaerob baktériumok jelenléte.

A szállítóeszköz jellemzői

A Stuart közeg, mint minden szállítóeszköz, megfelel bizonyos jellemzőknek, beleértve:

- Szaporodás nélkül fenntartja az életképes mikrobiális törzseket.

-Nem tartalmaz tápanyagokat; Vegyületeinek célja a minta hidratálása, megfelelő pH és ozmolaritás mellett.

-Gátolja néhány finom mikroorganizmus, például a Pneumococcus, autolizátumát.

-A használat ideiglenes, ezért nem szabad meghosszabbítani túl sokáig.

Készítmény

Félszilárd Stuart közeg redox mutatóval

Otthoni előkészítés

Hozzávalók

Nátrium-glicerofoszfát 10 gr

Nátrium-tioglükolát 1,0 g

Kalcium-klorid 0,1 gr

Metilénkék 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Desztillált víz 1 L

Keverje össze a komponenseket és melegítse, amíg teljesen fel nem oldódik. Öntsön csövekbe vagy speciális tamponokba. Ezeket az autoklávba helyezik, és 121 ° C-on 15 percig sterilizálják. Hagyja a csöveket függőleges helyzetben lehűlni (tömb alakjában). Szobahőmérsékleten tartsuk.

Előállítás kereskedelmi tápközeggel

Mérjünk be 14,1 g tápközeget 1 liter desztillált vízben. Rendszeresen melegítjük, amíg teljesen fel nem oldódik, felforralható. Az eljárás többi része, ahogy már leírtuk.

A dehidratált táptalaj krémszínű, és az előkészített felületének kéknek kell lennie. Ennek oka a metilénkék jelenléte.

A tápközeg pH-ját 7,4 ± 0,2 értékre kell beállítani

Folyékony módosított Stuart közepes (házi készítésű)

Hozzávalók

Nátrium-glicerofoszfát 10 gr

Nátrium-tioglikolát 1 gr

Kalcium-klorid-dihidrát 0,1 gr

Desztillált víz 1000 ml

Ugyanolyan összetevőkkel rendelkezik, mint a félszilárd, de nincs agar vagy metilénkék. Ebben az esetben az összetevőket hevítés nélkül keverjük össze, és a 0,5 ml-t elosztjuk 16 x 125 mm-es csövekben, csavaros kupakkal.

Autoklávban 121 ° C-on 10 percig sterilizáljuk. A mintavételhez dacron tamponokat kell használni, ha a mintát PCR-re, vagy rayon-t, ha tenyésztésre használják.

A csöveket szobahőmérsékleten tároljuk.

Alkalmazások

A kereskedelemben vannak speciális minta szállító eszközök, amelyeket úgynevezett culturette; Ez az eszköz egy hosszúkás, vékony cső, amelynek belsejében tampon van, és a végén van egy szegmens, amely a félszilárd vagy folyékony Stuart közeget tartalmazza.

Az eszközt kinyitják, és a tamponnal veszik a mintát. Ezután visszavezetik a csőbe, amíg a tampon hegyét be nem illesztik a félszilárd szállító közegbe; Néhányan a folyékony Stuart táptalajjal impregnált poliuretán szivacsot hoznak, amellyel a mintát nedves állapotban tartják.

Abban az esetben, ha gyenge mikroorganizmusok jelenlétére gyanakszik, a mintavétel során faszénel ellátott pamutmintákat kell használni.

A mintákkal, amelyeket tamponokkal vagy tamponokkal lehet venni, és ebben a közegben át lehet helyezni, garat váladék, végbél tamponok és különféle szekréciók, köztük hüvelyi, húgycső, seb, szem, szem, nyálkahártya és tályog.

A mintát a szállító közegben a laboratóriumba történő átvitel során kerülni kell a közeg extrém környezeti feltételeknek (túl hideg vagy túl forró) való kitetését. Kerülni kell a légköri nyomás hirtelen változásait is.

Az az idő, ameddig a tápközeg képes fenntartani a mikroorganizmus életképességét, a kérdéses törzstől függ. Például a Neisserias és Haemophilus nemzetségbe tartozó mikroorganizmusok esetében életképesek lehetnek akár 24 órán keresztül, de a törzsek, mint például a Salmonella vagy a Shigella, napokon és akár heteken is fennállhatnak.

Ha becslések szerint a minta feldolgozása több mint 4 napot is igénybe vehet, akkor a mintát -70 ° C-on célszerű fagyasztani.

A minta azonosítása a szállítóeszközben

Az elkészített szállítóeszköznek vagy a kereskedelmi kultúrnövénynek rendelkeznie kell egy címkével, amelyen a következő információkat helyezik el:

A beteg kereszt- és utóneve: elkerüli a minta összetévesztését.

Azonosító szám: kényelmes megrendelést tartani a munkahelyen.

Mintagyűjtő forrás: segít a bakteriológusnak a megfelelő táptalaj kiválasztásában.

Kísérő orvos: Néha szükséges a lehetséges konzultációk.

A minta begyűjtésének dátuma és időpontja: a minta elfogadása vagy elutasítása szükséges a minta begyűjtése és a laboratóriumi befogadás között eltelt idő függvényében.

Egyéb nagyon hasznos információ, amelyet csatolni lehet:

A feltételezhető diagnózis: a feltételezett diagnózis szerint irányítja a speciális táptalajok hozzáadását.

Antibiotikumokkal történő kezelés: hasznos, ha mellékelni kell az antimiogramhoz.

Mindezek az információk elengedhetetlenek a minta megfelelő feldolgozásának biztosításához.

QA

A Stuart táptalaj teljesítményének értékelése céljából az ismert törzseket beolthatjuk és 25 ° C-on tarthatjuk, mint például: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae.

Minden esetben várhatóan visszanyeri a kérdéses mikroorganizmust, amelyet 24 órán keresztül tartanak fenn.

Másrészt más törzsek is felhasználhatók, mint például: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 és Escherichia coli ATCC.

Minden esetben akár 96 órán keresztül is várható a bőséges gyógyulás.

korlátozások

Egyes tanulmányok biztosítják, hogy a Stuart-tápközegben található glicerofoszfát bizonyos koliformák által metabolizálható, többek között a Gram-negatív baktériumok között, és ezért szaporodhat ezen a táptalajon.

Ez a kockázat minél tovább nő a minta feldolgozása késleltetésével. Hasonlóképpen, ezt befolyásolja a Stuart közepes expozíciója a magas hőmérsékletnek a szállítás során.

Irodalom

1. "Közlekedési közeg (mikrobiológia)." Wikipédia, a szabad enciklopédia. 2018. április 13., 10:36 UTC. 2019. április 1. Elérhető az es.wikipedia.org oldalon
2. Microkit Laboratories: táptalaj. Stuart Szállítás. Elérhető: elérhető: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Stuart szállítóeszközei. Elérhető a következő címen: lablinsan.cl
4. Tudományos MDM. A Stuart mikrobiológiai transzportközeg előnyei. Elérhető a következő címen: mdmc Scientifica.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017.Attól elérhető: metrixlab.mx
6. Forbes B., Sahm D., Weissfeld A. (2009). Bailey és Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Szerkesztő Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiológiai diagnózis. 5. kiadás Szerkesztő Panamericana SA Argentina.