KONGÓI VÖRÖS: JELLEMZŐK, ELŐKÉSZÍTÉS ÉS ALKALMAZÁSOK - BIOLÓGIA - 2026

A Kongói vörös egy azófesték fehérjékhez, amelyeket diazóniumsó és aktív aromás gyűrű kapcsolásával állítanak elő. Ez az anyag képes elnyelni az elektromágneses sugárzást a látható spektrumban, ezért intenzív színű.

Negatív töltésű. Ezért affinitása van a pozitív töltésű sejtkomponensekhez, például bizonyos fehérjeanyagokhoz. Színe a pH-tól függ. Ebben az értelemben, ha a közeg savas (<3-nál alacsonyabb), a szín intenzív kék. PH3 - pH 5,2 között fuksia (fordulási zóna), és> 5,2 pH-nál a szín mélyvörös.

Dehidrált Kongói Vörös és Kongói Vörös kolloid oldat. Forrás: Pixinio.com és Wikipedia.com

Nagyon sokoldalú anyag, mivel többféle felhasználással rendelkezik. Színezőanyagként használják a textiliparban, valamint cellák és szövetek készítéséhez.

Az enzimatikus hatást mérő tápközegek előállítása, mint pH-indikátor, kontroll anyagként a spektrofotométerek megfelelő működésének értékelésében, a biofilmek kialakulásának tanulmányozásában vagy az amiloidok diagnosztizálásában.

Hasonlóképpen, lehetővé tette a baktériumok és a gombák szerotípusainak megkülönböztetését azáltal, hogy meghatározták falukban a fajlagos szerkezeteket (lipopoliszacharidok).

Kongói jellemzők piros

Ezt az anyagot Böttger fedezte fel 1884-ben. Ez egy diazónium-származék, amelyet a benzidin bisz-diazoesav és naftionsav képez. A Kongói vörös molekula 21 Armstrong-ot méri, és a molekulatömeg körülbelül 8000 g / mol.

A Kongóvörösre jellemző, hogy vízben oldódik, és még inkább szerves oldószerekben, például etanolban, és így kolloid oldatot képeznek.

Affinitással rendelkezik a cellulóz, az amiloid szövet és a pozitív töltésű celluláris komponensek iránt.

Készítmény

A Congo Red-t különböző koncentrációkban készítik, az alkalmazott technikától függően. Legtöbbjük 1%, 2%, 0,1% -ban használ kongói vörös színt.

Például a 2% kongói vörös előállításához meg kell mérni 2 g dehidratált élelmiszer-színezéket és hozzáadni 100 ml desztillált vizet. Ezután borostyán üvegben tartják.

Alkalmazások

Színezőanyagként a textiliparban

Egy ideje a textiliparban széles körben használták a pamutba való rögzítés miatt, de jelenleg nem használják, mivel rákkeltő, valamint azért is, mert a színe nem stabil, elszíneződik dörzsöléssel.

A biofilm képződési képességének meghatározása

Kimutatták, hogy a mikroorganizmusok biofilmképző képessége virulencia faktor.

Ebben az értelemben a Kongói vörösfestéket használják módszerként a biofilm képződésének meghatározására. Kongói vörös kötődik a biofilmben lévő exopoliszacharidokhoz. Más módszerekhez viszonyítva ez a legkevésbé ajánlott, mivel előfordulnak nagy hamis negatívok.

A módszer Kongói vörös agart alkalmaz, amely vér-agarból áll alapként, glükózból (10 g / l) és Kongói vörösfestékből (0,4 g / l). Az értékelni kívánt törzseket beoltjuk a tápközegbe, és 24 órán át inkubáljuk 37 ° C-on, majd 48 órán át szobahőmérsékleten inkubáljuk.

Pozitív teszt akkor bizonyítható, ha megfigyelték a fekete színű és száraz külső megjelenésű kristálytelepeket.

A spektrofotométerek minőségellenőrzése

Annak felméréséhez, hogy egy abszorbancia- vagy tranzakciómérő berendezés megfelel-e a nemzetközi előírások által meghatározott fotometriai paramétereknek, egyszerű módszerrel lehet megállapítani, hogy a berendezés eredményeket ad-e az elfogadhatóság tartományán belül.

Az egyik értékelési módszer a kongói vörös használata, az izoszbetikus pont alapján.

Az izoszbetikus pont az a hullámhossz, amelyen a Kongói vörös ugyanolyan abszorpciót bocsát ki, pH-tól, koncentrációtól és hőmérséklettől függetlenül. Az abszorbancia értéke rögzített, és referenciaként használható.

Kongói vörös elméleti izoszbetikus pontja ismerten 541 nm. Ha a kapott érték eltér, akkor ismert, hogy a berendezésnek hullámhossz-eltolódási problémái vannak, és ezt egy speciális szakembernek ellenőriznie kell.

Tápközegek előkészítése

Ortiz és munkatársai: Leírja a CMC agarnak nevezett Kongói vörösfestékkel és karboxi-metil-cellulózzal elkészített táptalajt, a cellulit mikrobiális törzseinek kimutatására; vagyis a celluláz termelők (endoglikonok, exoglukanázok és ß-glükozidáz).

Ez a közeg intenzív színű. A szín eloszlik az endoglükáz enzim hatására, amely megbontja a karboxi-metil-cellulóz szerkezetét. Ez pozitív reakcióra utal.

A viszkozitás és abszorbancia csökkenése lehetővé teszi az enzimaktivitás számszerűsítését. Például a Streptomyces sp.

A mikroorganizmusok azonosítása

A Kongói vörösnek affinitása van bizonyos törzsek poliszacharid szerkezetéhez, így elérve ezeket a mikroorganizmusokat. Közöttük az Escherichia coli és a Shigella flexneri.

A kongói vörös agarlemezeket jellegzetes telepek, például az Azospirillum sp előállítására is használják, amely többek között skarlátvörös telepeket eredményez.

Sejt- és szövetfolt

A Kongói vörösvirág egyik leggyakoribb alkalmazása az amyloidosis diagnosztizálásában való hasznossága. Ez a furcsa betegség egy rendellenes protein extracelluláris felhalmozódásából áll, különféle szervekben. Ezt a kóros fehérjét a csontvelőben állítják elő, amiloidnak nevezik.

A kongói vörösnek nagy affinitása van ezen anyaggal szemben. Ezt a tulajdonságot arra használják, hogy kimutatja jelenlétét szövettani szövetmetszetekben. A Congo Red-t hematoxilinnel / eozinnal együtt használják erre a célra.

Az amiloid szövet és a Kongói vörös egység nem poláris hidrogénkötések útján jön létre, a karboxilcsoportok és az aminocsoportok között. Az amiloid protein biztosítja a karboxilcsoportokat (COOH), és Kongó vörös aminocsoportot.

Az amiloid szövetek különböző színűek, a rózsaszíntől a mélyvörösig, a fénymikroszkóp alatt látva. Kettős polarizációjú mikroszkópokon ezeket a készítményeket patognómás almazöld kettős törés jellemzi.

Vagyis dikroizmust mutatnak, mivel az amiloid szálak anizotropok. Ez a megfigyelés megerősíti a diagnózist.

A szövetfestés a Kongói vörösvel kompatibilis más diagnosztikai módszerekkel, például immuncitokémiai módszerekkel, és újrafesthető.

PH-mutatóként

A pH-változásokkal szembeni ellenállás tulajdonságát a kromoendoszkópia néven ismert módszer használja.

Ez a technika színezékeket és pH-mutatókat használ, amelyek lehetővé teszik bizonyos patológiák kimutatását. Ezek között szerepel a Kongói vörös alkalmazása, amely felfedheti a korai rákos fókuszokat a gyomor nyálkahártyáján, és amelyet a savasság jeleként használnak.

A technika azon a tényen alapul, hogy a sav-pH-értékű kongói vörös fekete. Ezért, miután a Kongói vörös oldatot a gyomor nyálkahártyájára helyezték, a biopsziához mintát vesznek azok a területek, ahol sápadtság mutatkozik, azaz ahol nincs savtermelés. Ez a rákos fókusz jelenlétére vagy a parietális sejtek elvesztésére utal.

Irodalom

1. "Kongói Vörös." Wikipédia, a szabad enciklopédia. 2019. május 8., 12:13 UTC. 2019. május 16., 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Új módszer az endoglukanázaktivitás meghatározására a cellulóz-Kongó vörös komplex alapján. Orinoquia. 2011. június; 15 (1): 7-15. A következő címen érhető el: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Biofilm termelés a szarvasmarha mastitisből izolált Staphylococcus aureus genotípusaiban Kubában. Rev Salud Anim.. 2013. december; 35 (3): 189-196. Elérhető a következő címen: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. A szisztémás amyloidosis bőr megnyilvánulása diagnosztikai kulcsként: Klinikai eset. Rev. medic. Chile. 2012 április; 140 (4): 499-502. Kapható: scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Spektrofotométerek és fotokoriméterek Gyakorlati frissítési útmutató. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (szeptember-december): elérhető: redalyc.org
6. J Marín, Díaz J és Solís J. Kromatoendoszkópia Helicobacter pylori fertőzésben: a reakcióidő? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Szerves kémia. Editorial Reverté. Barcelona, ​​Spanyolország. Elérhető a következő címen: books.google.co.ve
8. Murillo M. Szövetfestési eljárások. A Guadalajarai Egyetem, Mexikó. Elérhető a következő helyen: academia.edu
9. Paillié M. A fehér lóhere (Trifolium repens) rizoszférikus talajából izolált Actinobacteria baktériumok cellulolitikus, ligninolitikus és amilolitikus aktivitásának meghatározása, 2012. Pontificia Universidad Javeriana Tudományos Kar Ipari Mikrobiológia Bogotá DC elérhető: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R és Baldani V. Azospirillum sp. Izolálása és azonosítása a guinea fűben (Panicum maximum Jacq.) a Cesar-völgyből. Legelők és takarmányok, 2010; 33 (3): 1-8 Kapható: scielo.