SZELENITLEVES: ALAPOZÁS, ELŐKÉSZÍTÉS ÉS FELHASZNÁLÁSOK - BIOLÓGIA - 2026

A szelenit szelektív folyékony táptalaj. Leifson azt tervezte, hogy olyan mintákat gazdagítson, amelyekben feltételezhető, hogy a Salmonella nemzetség enteropatogén baktériumai vannak jelen.

Ez a táptalaj megfelel az Amerikai Közegészségügyi Szövetség (APHA) követelményeinek, ezért elfogadható többek között széklet, vizelet, folyékony vagy szilárd étel, víz mintákban a szalmonella jelenlétének vizsgálatára.

Szelenit húsleves. Forrás: A fotó készítette MSc. Marielsa gil

Kémiai összetétele elősegíti ezeknek a mikroorganizmusoknak a helyreállítását, és ezzel gátolja mások növekedését. Elsődlegesen mérgező a legtöbb Enterobacteriaceae családba tartozó baktériumra. Ugyanakkor lehetővé teszi a Shigella törzsek helyreállítását, és nem gátolja a Pseudomonas és Proteus növekedését.

Vízmentes nátrium-hidrogén-szelenitből, vízmentes nátrium-foszfátból, peptonokból és laktózból áll. Van még egy változat, amelyhez cisztin adagolódik, ennek neve a szelenit-cisztin táptalaj.

Jelenleg a szelenit-cisztin táptalaj használata előnyös, mivel a szalmonella visszanyerésének nagyobb százaléka érhető el, ami megegyezik azzal, amelyet más szelektív közegekkel azonos célra, például nátrium-tetrationát-táptalajon megfigyeltünk.

bázis

A levesben lévő peptonok tápanyagként szolgálnak a mikroorganizmusok megfelelő fejlődéséhez. A szalmonella törzsek peptoneket használnak nitrogén, vitamin és aminosav forrásként.

A laktóz az fermentálható szénhidrát, míg a nátrium-szelenit gátló anyag, amely megállítja a Gram-pozitív baktériumok és a bélflórában jelenlévő baktériumok többségét, különösen az Enterobacteriaceae családban. A nátrium-foszfát az a puffer, amely stabilizálja a közeg pH-ját.

L-cisztintartalmú szelenitleves változat esetén ez a kiegészítő vegyület redukálószer, amely minimalizálja a szelenit toxicitását, növelve a szalmonella visszanyerését.

Készítmény

-Szelenitleves

Ha vannak a keverék összetevői, akkor mérlegelheti:

4 g vízmentes nátrium-hidrogén-szelenit.

10 g vízmentes nátrium-foszfát.

5 g peptonok.

4 gramm laktózt.

Oldjuk fel a vegyületeket 1 liter steril desztillált vízben. Kissé felmelegíthető, hogy teljesen feloldódjon.

Egyes laboratóriumok 10 percig folyékony gőzzel kiöntik a közeget, hogy sterilizálják, mivel autokláv nem használható. Ha a tápközeget sterilizálják, akkor felhasználásig hűtőszekrényben tárolhatja.

Szintén előállíthatatlan, és közvetlenül 10-15 ml-es adagolást biztosít steril steril kémcsövekbe.

Ebben az esetben hagyja pihenni és azonnal felhasználni. Mivel a tápközeg nem steril, későbbi felhasználás céljából nem tárolható hűtőszekrényben.

- A kereskedelmi környezet előkészítése

Ha rendelkezésre áll a kereskedelmi táptalaj, mérjünk le 23 g dehidrált közeget és oldjuk fel egy liter steril desztillált vízben. Rövid ideig melegítse az oldódás befejezéséhez. Ne autoklávot végezzen. Aszeptikusan tálaljuk 10 vagy 15 ml-t steril kémcsövekben.

A tápközeg végső pH-jának 7,0 ± 0,2-nek kell lennie.

Meg kell jegyezni, hogy a dehidrált közeg bézs színű, a készítmény világos és áttetsző borostyánszínű.

Szelenit-cisztin húsleves változat

Ugyanazokat a vegyületeket tartalmazza, mint a szelenit leves, de hozzáadunk 10 mg cisztinet. Az eljárás többi része pontosan megegyezik a fentiekkel.

Alkalmazások

Ez a táptalaj speciális az epidemiológiai vizsgálatokhoz, olyan esetekben, amikor a betegség még nem akut stádiumában van, tünetmentes betegek vagy egészséges hordozók.

A Salmonella nemzetség izolálása általában nehéz, mivel ezek általában csak rosszul szennyező minták. Kis mennyiségekben könnyen átfedésben lehet más, nagyobb mennyiségben található baktériumok nemzetségeivel.

Másrészt a feldolgozott élelmiszerek előállításának nyersanyaga gyakran hőnek, dehidratációs folyamatnak, többek között fertőtlenítőszerek, sugárzás és tartósítószereknek van kitéve.

Ezért a nyersanyagban jelen lévő szalmonellákat rosszul kezelik, ha a terméket a fent említett ipari folyamatoknak vetik alá. Hasonlóképpen, olyan klinikai minták esetében, mint például a széklet, a törzsek gyengék lehetnek, ha antibiotikumokkal kezelt betegektől származnak.

Ezért minden olyan mintát, amelyben a szalmonella jelenlétét gyanítják, előzetesen dúsítani kell laktózlevesben, majd szelenit húslevesben kell dúsítani, hogy a szelektív közegekben, például SS agar, xilóz agar, lizin-dezoxikolát (XLD) visszanyerésének optimalizálása érdekében szelenit levesben gazdagítsák.), bélben oldódó Hektoen agar (HE) és élénkzöld agar, többek között.

elvetett

A székletmintákhoz vegyen 1 g mintát, és egy csőbe szuszpendáljon 10–15 ml szelenit húslevest. Ha a széklet folyékony, vegyen be 1 ml-t és szuszpendálja a levest. Rektális tamponok esetén ürítsük ki a tampon anyagát a levesbe.

Szilárd táplálékmintákban vegyen fel 1 grammot és szuszpendálja a szelénlevesben.

A folyékony élelmiszerekben egyenlő részben keverjük össze a szelenit húslevest dupla koncentrációban.

A vizeletmintákra centrifugáljuk, a felülúszót dobjuk el, vegyük az összes üledéket és szuszpendáljuk a szelenitlevesben.

A húslevest 37 ° C-on inkubáljuk 24 órán át. A baktériumok növekedését zavarosság bizonyítja. Mintánként egy további cső is beépíthető, hogy 42 ° C-on inkubáljuk. Ezt követően szelektív szilárd tápközeget vetünk a szelenit táptalajból.

QA

A sterilitás ellenőrzése érdekében minden egyes nem oltott tételből a szelenit táptalajt inkubáljuk 37 ° C-on 24 órán át. Várhatóan a táptalaj zavarossága vagy színe nem változik.

Az ismert törzsek felhasználhatók a táptalaj megfelelő működésének ellenőrzésére, például:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 és Proteus mirabilis ATCC 43071.

A várt eredmények:

• Az első három baktériumtörzs esetében a növekedésnek kielégítőnek kell lennie.
• Escherichia coli részleges gátlás esetén.
• A Proteus mérsékelt növekedéséhez.

korlátozások

A szelenit táptalaj mérgező az emberi bőrre, ezért kerülni kell a közvetlen érintkezést.

Irodalom

1. Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J. A nátrium-szelenit és a nátrium-tetrationát táptalajának összehasonlítása, mindkettőt 37 ° C-on és 42 ° C-on inkubálva. a Salmonella spp izolálása a hordozó székletéből. Rev. Biomed 2003; 14 (4): 215-220
2. Britannia Laboratories. Selenito húsleves. 2015.Attól elérhető: britanialab.com
3. Neogen Laboratories. Szelenit húsleves. Elérhető a következő címen: foodsafety.neogen.com
4. González -Pedraza J, Pereira -Sanandres N, Soto -Varela Z, Hernández -Aguirre E, Villarreal- Camacho J. A Salmonella spp. Mikrobiológiai izolálása. és molekuláris eszközei annak kimutatására. Egészségügy, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. Elérhető a következő címen:
5. Forbes B., Sahm D., Weissfeld A. (2009). Bailey és Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Szerkesztő Panamericana SA Argentina.