TRYPTICASEIN SZÓJALEVES: ALAPOZÁS, ELŐKÉSZÍTÉS ÉS FELHASZNÁLÁS - BIOLÓGIA - 2026

A szójaleves tripton folyékony táptalaj, nagyon tápláló, nem szelektív. Nagy sokoldalúságának köszönhetően az egyik legszélesebb körben alkalmazott folyékony táptalaj a mikrobiológiai laboratóriumban.

Ismert tripszikus szójaleves vagy emésztett kazein-szója néven is ismert, amelynek rövidítése TSB az angol rövidítésnél. Tryptic Soy Broth vagy CST a rövidítés spanyolul. Használata összetételének köszönhetően nagyon változatos. Tripteinből, szójapeptonból, nátrium-kloridból, dikálium-foszfátból és glükózból áll.

Tryptazein szójaleves oltva Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 törzsével, ahol megfigyelhető pigmenttermelés. Forrás: A fotó készítette MSc. Marielsa Gil.

Képesek reprodukálni a klinikai szempontból fontos patogén baktériumokat, beleértve azokat, amelyek táplálékigényesek és anaerob baktériumok. Néhány opportunista és szennyező gombák szintén kialakulhatnak ebben a környezetben.

Magas táplálkozási képessége miatt nagyon érzékeny a mikrobiális szennyeződés észlelésére, ezért az USDA Állat- és Növény-egészségügyi Felügyeleti Szolgálata választotta az oltások mikrobiológiai elemzésére.

Hasonlóképpen, a trippticasein szójaleves megfelel a különféle gyógyszerkönyvek (Európai EP, Japán JP és Észak-Amerikai USP) követelményeinek ipari szintű termékek, például kozmetikumok és élelmiszerek mikrobiológiai vizsgálatához.

Másrészt érdemes megemlíteni, hogy a nagyszerű felhasználhatóság ellenére ez a közeg viszonylag olcsó, ezért a legtöbb mikrobiológiai laboratórium számára megfizethető. Ez is nagyon könnyű elkészíteni.

bázis

A triptein, a pepton és a glükóz alapvető táplálkozási tulajdonságokkal rendelkezik, így ideális közeggé teszi a gyors mikrobiális növekedést.

Körülbelül 6-8 órás inkubáláskor a legtöbb mikroorganizmusban már megfigyelhető a növekedés. Vannak azonban lassan növekvő törzsek, amelyek növekedése napokig tarthat.

A nátrium-klorid és a dikálium-foszfát ozmotikus egyensúlyt és pH-szabályozót működik. A növekedés meglétét a táptalaj zavarosságának megjelenése bizonyítja; ha nincs növekedés, a táptalaj áttetsző marad.

Világos színének köszönhetően megfigyelhető a pigmentek képződése, például a cikk elején látható képen, amely megfelel a Pseudomonas aeruginosa által termelt pigmentnek.

Készítmény

-Triptysein szójaleves

A tripszikus szójaleves elkészítéséhez 30 g dehidratált kereskedelmi tápközeget kell digitálisan megmérni. Ezután feloldjuk egy lombikban lévő liter desztillált vízben.

Az elegyet 5 percig hagyjuk pihenni, majd hőforrásba helyezzük, hogy elősegítsük a közeg feloldódását. 1 percig főzés közben gyakran keverni kell.

Feloldódás után a megfelelő méretű csövekbe osztják szét. Csövek pamut dugóval vagy bakelit kupakkal használhatók. Ezt követően a csöveket az autoklávban lévő közeggel sterilizáljuk 121 ° C-on 15 percig.

A tápközeg pH-jának 7,3 ± 0,2 értéken kell maradnia

Meg kell jegyezni, hogy a dehidrált táptalaj színe világos bézs színű, és 10–35 ° C között, száraz helyen kell tárolni. Amíg az elkészített leves halvány borostyánszínű, hűtőszekrényben (2–8 ° C) kell tárolni.

- A tripsztazin szójaleves változói

A módosított tripta-pazin-szójalevest elkészíthetjük epesók és novobiocin hozzáadásával, hogy ez szelektív legyen az E. coli izolálására. Ugyanezen célra egy másik lehetőség a tripszikáz szójaleves elkészítése, kiegészítve vancomicinnel, cefiximrel és tellurinnal (2,5 µg / ml).

Másrészt, további glükóz (0,25%) adható a tripszikus szójaleveshez, amikor a cél a biofilmek képződésének stimulálása.

Használat

Ez elég tápláló, hogy lehetővé tegye olyan ízletes vagy igényes baktériumok, mint például a Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp és Brucella sp, szaporodását anélkül, hogy vérrel vagy szérummal kellene kiegészíteni őket.

Hasonlóképpen, néhány gombák is kifejlődhetnek ebben a táptalajon, például a Candida albicans Complex, az Aspergillus sp és a Histoplasma capsulatum.

Ezenkívül ez a táptalaj anaerob körülmények között ideális a Clostridium nemhez tartozó baktériumok, valamint a klinikai jelentőséggel bíró nem sporulált anaerob baktériumok visszaszerzésére.

6,5% nátrium-klorid hozzáadása esetén felhasználható az Enterococcus és más D csoport Streptococcus növekedéséhez.

A kutatás szintjén nagyon hasznos volt különféle protokollokban, különösen a biofilm vagy biofilmképző baktériumok vizsgálatában. Arra is felhasználják, hogy elkészítsék a 0,5% -os Mac Farland baktérium-szuszpenziót, amely az antibiotikum Kirby és Bauer módszerrel történő elvégzéséhez szükséges.

Ebben az esetben 3–5 hasonló megjelenésű kolóniát veszünk, és 4-5 ml tripta-pizin szójalevesben emulgeáljuk. Ezután 2-6 órán keresztül 35-37 ° C-on inkubáljuk, majd steril sóoldattal a kívánt koncentrációra állítjuk be. A trippticasein szójaleves nem használható 18–24 órás inkubáció alatt.

elvetett

A mintát közvetlenül be lehet vetni, vagy a szelektív táptalajból vett tiszta telepeket szubkultúrázhatjuk. Az inokulumnak kicsinek kell lennie, hogy az inkubálás előtt ne zavarja el a közeget.

Általában 37 ° C-on inkubálják aerobiosisban 24 órán keresztül, de ezek a körülmények a keresett mikroorganizmustól függően változhatnak. Szükség esetén több napig is inkubálható anaerob körülmények között 37 ° C hőmérsékleten. Például a gyorsan növekvő vagy igényes mikroorganizmusok akár 7 napig inkubálhatók.

A gyógyszerészeti anyagok - például oltások - mikrobiológiai elemzésében a protokollok szigorúbbak. Ezekben az esetekben a növekedés nélküli táptalajt addig nem dobják el, amíg el nem éri a 14 napos folyamatos inkubációt.

QA

Minden előkészített tételből 1 vagy 2 nem beoltott csövet inkubálunk sterilitásuk igazolására. Nem változhat.

Ismert törzseket is ültethetünk viselkedésük felmérésére. A felhasználható törzsek a következők:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans, ATCC 10231, a Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 vagy 25923, Escherichia coli ATCC 8739, Streptococcus pyogenes ATCC 19615, a Streptococcus pneumoniae ATCC28CC305, pneumoniae ATCC28omonas 905, pneumoniae ATCC28omonas305.

A növekedésnek minden esetben kielégítőnek kell lennie az egyes mikroorganizmusok megfelelő légköri és hőmérsékleti viszonyok között.

korlátozások

-A glükóz fermentációja a közeg pH-jának csökkenését okozza a savak képződése miatt. Ez kedvezőtlen lehet bizonyos savasság szempontjából érzékeny mikroorganizmusok túlélésére.

- Nem javasolt a törzsek fenntartása, mivel a savasságuk mellett a baktériumok néhány nap elteltével kimerítik a tápanyagokat, aminek következtében mérgező anyagok halmozódnak fel, amelyek a környezetet képtelenné teszik.

- Az összes sterilitási protokollt ügyelnie kell, mivel a húslevest könnyen szennyezik.

-A triptapázin szójaleves elkészítése után nem szabad megkísérelnie a húslevest áthelyezni egy másik steril csőbe, mert az ilyen manőver nagyon érzékeny a szennyeződésre.

Irodalom

1. Cona E. A jó érzékenységi vizsgálat feltételei agar diffúziós teszttel. Rev. chil. infectol. 2002; 19 (2): 77-81. Elérhető a scielo.org oldalon
2. Britannia laboratórium. Triptein szójaleves. 2015.Attól elérhető: britanialab.com
3. MCD laboratórium. Trypticasein szójaleves. Elérhető a következő címen: electronic-systems.com
4. Neogén laboratórium. Triptich szójaleves. Elérhető a következő címen: foodsafety.neogen.com
5. Forbes B., Sahm D., Weissfeld A. (2009). Bailey és Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Szerkesztő Panamericana SA Argentina.
6. Rojas T, Vásquez Y, Reyes D, Martínez C, Medina L. Az Escherichia coli O157: H7 tejkrémekben való visszanyerésére szolgáló mágneses immunszétválasztási technika értékelése. ALAN. 2006; 56 (3): 257-264. Elérhető a scielo.org.ve oldalon
7. Gil M, Merchán K, Quevedo G, Sánchez A, Nicita G, Rojas T, Sánchez J, Finol M. A biofilm képződése Staphylococcus aureus izolátumokban az antimikrobiális érzékenység és a klinikai eredet alapján. Vitae. 2015-ig; 62 (1): 1-8. Elérhető a saber.ucv.ve oldalon
8. Narváez-Bravo C, Carruyo-Núñez G, Moreno M, Rodas-González A, Hoet A, Wittum T. Az Escherichia coli O157: H7 izolálása kettős felhasználású szarvasmarha ürülékmintákból a Miranda településről, a Zulia állam, Venezuela. Rev. Cient. (Maracaibo), 2007; 17 (3): 239-245. Elérhető a scielo.org oldalon