SAFRANIN: JELLEMZŐK, FELHASZNÁLÁS, TECHNIKÁK, TOXICITÁS - KÉMIA - 2025

A szafranin egy meriquinoide színezék, elemzi annak kémiai szerkezete, amelynek két benzoid gyűrűk és 2 kinoidális gyűrűk, az utóbbi azok, amelyek a vörös szín.

Dimetil-szafraninnak vagy bázikus vörös 2-nek is nevezik, rövid formájában, mivel tudományos neve 3,7-diamino-2,8-dimetil-5-fenil-fenazinium-klór-dimetil-szafranin, és a kémiai képlet C ₂₀ H ₁₉ N ₄ Cl.

A szafranin kémiai szerkezete, jelezve a benzenoid és a kinoid gyűrűket / a szafranin vizes oldata. Forrás: NEUROtiker szerkesztette az MSc. Marielsa Gil / LHcheM

Van egy olyan változat, amelyet trimetil-szafraninnak neveznek, de a két anyag között nincs szignifikáns különbség.

A szafranin monokróm festék, és a kémiai összetétel tulajdonságaitól függően pozitív töltésű anyag. Ezért affinitása van a negatív töltésű struktúrákhoz. Ezeket a szerkezeteket pirosra festették.

Ez a tulajdonság számos szövettani eljárásban alkalmazhatóvá teszi különböző sejtszerkezetek, mind az eukarióta, mind a prokarióta szervezetek megfestésére.

A szafranint kontrasztfestékként használják a bakteriológia rutinszerű alkalmazásának fontos és jól ismert technikáiban. Ezek a technikák a következők: Gram-Hucker folt, Schaeffer Fulton folt spórákhoz vagy bakteriális kapszulák festése többek között.

jellemzők

A sáfrány színe (a Crocus sativus virág stigmáiból nyert fűszer) ihlette a festék megnevezését. A sáfrány kifejezésből a szafranin neve szerepel. Ennek oka a sáfrány színe és a színezék nagy hasonlósága.

A szafranin kristályok vagy por formájában kapható, mindkét formátum vízben oldódik. A szafranin festék szagtalan. Vörös foltok. A szafraninfestéket vonzó struktúrákat szafranofileknek nevezzük.

Szerkezetileg a szafranin komplex, két benzenoid gyűrűvel rendelkezik a végén, és közepén vannak a két kinoid gyűrű, ahol az N ⁺ kation található. A szerkezet középpontjában a szín biztosításáért felelős rendszer áll. Ez a tulajdonság miatt ezt a színezéket a II. Kategóriába sorolják.

Használat

A szafranint különféle struktúrák festésére használják. Különösen kiemeli a gyomor-bél traktusban található Kulchitsky sejteket, más néven enterokromaffin sejteket.

Meg tudja festeni a Rickettsiaceae családba tartozó mikroorganizmusokat. Hasonlóképpen, különféle technikákban alkalmazzák, például Koster-módszerben, amelyet módosítottak a Brucella nemzetségbe tartozó baktériumok megfestésére.

Másrészt a szafranint használják a Schaeffer Fulton spórafestési technikában és a Gram-Hucker festésnél. Mindkét módszerben a szafranin kontrasztfestékként működik.

Az elsőben a spórák malachitzöld színűek, a többi szerkezet pedig szafranin vörös. A második esetben a gram-negatív baktériumok elveszítik a lila kristály színét az elszíneződés során, ezért a szafranin az, amely a gram-negatív baktériumokat vörösre festi.

Ezenkívül a szafranint a bakteriológiában használják a Brucella agar táptalaj előállítására 1: 5000 szafranin hígítás mellett. Ez a táptalaj megkülönbözteti a Brucella suis fajokat a többi fajtól. A Brucella melitensis és a Brucella abortus ezen a táptalajon növekszik, de a B. suis gátlása megtörtént.

Az agráriparban a szafranint 2,25% -ban alkalmazzák és 1:10 arányban hígítják a cukornád növény szárának mintáinak megfestésére.

Ezt a növényt általában a Leifsonia xyli subsp. Baktériumok érintik. xyli, amely károsítja a növény xylémét. A festett szárakat kiértékeljük a xylem erek működésének meghatározása céljából.

Technikák a bakteriológia területén

Castañeda folt az r festéshez

Vér- vagy szövetkenetét pufferoldatba helyezzünk (foszfátpuffer pH 7,6). Hagyjuk spontán módon megszáradni, majd 3 percig metilénkékkel fedjük le, és szfraninnal ellenfestjük. A Rickettsiae kék színű, ellentétben a piros háttérrel.

Koster folt módosítva

Kenetet készítünk és lángolunk a gyújtóban a rögzítéshez. Ezt követően 2 rész telített vizes szafranin és 3 rész 1 mol / l KOH-oldat keverékével fedjük be 1 percig. A mosást desztillált vízzel végezzük, és 1% karbol-metilénkékkel ellenkezeljük.

Ha a minta Brucella nemzetségbe tartozó baktériumokat tartalmaz, akkor kék alapon narancssárga színűek lesznek.

Bakteriális kapszula festés

A bakteriális szuszpenzió keverékét India tintával készítjük és hozzáadunk szafranint. A mikroszkóp alatt vöröses halo jelenik meg minden baktériumkapszula körül fekete háttérrel.

Spórafestés

A baktérium-szuszpenzióval szétszórják. Ezután melegítjük. Az oldatot 5% malachitzöld borítja, amely gyakran ég a gőzök kibocsátásáig. A folyamatot 6-10 percig megismételjük. Végül vízzel mossuk, és 0,5 másodpercig szafraninnal ellenkezeljük 30 másodpercig. A bacillus piros és a spóra zöld.

Gram-Hucker folt

Kenetet készítünk bakteriális szuszpenzióval és rögzítjük a melegben. Fedje le a lemezt kristályibolya 1 percig. Ezután a lugolt peptidoldatként 1 percre helyezzük. Ezt követően aceton-alkohollal fehérítjük, és végül 30 másodpercig ellenkezeljük szafraninnal.

A gram-pozitív baktériumok kékes lila, a gram-negatív baktériumok pedig piros színűek.

Egyes laboratóriumok abbahagyták a Gram-Hucker technika alkalmazását a módosított Gram-Kopeloff technika alkalmazására. Az utóbbiban a szafranint bázikus fuksin helyettesíti. Ennek oka az, hogy a szafranin gyengén megfesti a Legionella, Campylobacter és Brucella nemzetségeket.

Technikák a szövettan területén

Kulchitsky sejtfestés (enterokromaffinok)

A gyomor-bél traktus szövetmetszeteit ezüst-kloriddal megfestjük. Ezután nátrium-tioszulfáttal elszínezzük, és végül szafraninnal ellenkoncentráljuk.

A Kulchitsky sejteket megkülönböztetik fehéresbarna granulátumok.

Osteoarthritis folt

Mivel a szafranin pozitív töltéssel rendelkezik, nagyon jól kötődik a glikozaminoglikánok karboxil- és szulfátcsoportjaihoz. Ezek azok a proteoglikánok, amelyek alkotják az ízületi porcot. Ebben az értelemben, amikor szafranin-O-val festenek, azonosítható, hogy van-e porcvesztés.

A porcszövetek elvesztését a Mankin skála vagy az osteoarthritis skála alapján lehet mérni.

A technikát az alábbiakban ismertetjük: a szövettani metszetet egy tálcába merítjük Weigert vas-hematoxilin-oldattal, majd átvezetjük savas alkoholon és vízzel mossuk.

Folytassa a színezési folyamatot úgy, hogy a lapot gyorsan zöldbe meríti, ecetsavval mossuk, és most belemerítjük a szafranin O-ba. A folyamat befejezéséhez dehidratáljuk különböző koncentrációjú alkoholokkal növekvő sorrendben. Az utolsó lépéshez a minta tisztításához xilolt vagy xilolt kell használni.

A lemezeket kanadai balzsammal vagy hasonlóval kondicionáljuk, és a mikroszkóp alatt megfigyelhetők.

Ezzel a módszerrel a magok feketével, a csont zöld és a porc, ahol a proteoglikánok vörös színűek.

Folt a makroalgák azonosítására

Pérez és társai 2003-ban egy egyszerű és olcsó technikát javasoltak a makroalgák festésére. A mintákat paraffin hisztológiai szakaszokban készítjük. A metszeteket 1% glicerinnel rögzítjük, lehetővé téve a teljes száradást. Ezután xilolba helyezzük, hogy eltávolítsuk a paraffint.

A metszetet rehidráljuk úgy, hogy különféle koncentrációjú etanolt (csökkenő sorrendben) tartalmazó etálla-sorozatokon át mindegyik 2 percig átvezetjük.

Ezt követően 5 percig 1% szafranin és 1% toluidin-kék 3: 1 keverékével festettük, mindkettő 50% etanollal készült. Három csepp pikrinsavat adunk az elegyhez, amely lágyítószerként működik.

Ezután kiszárítja az alkoholtálcák újbóli áthaladásával, de ezúttal emelkedő módon. Végül xilollal öblítjük, és a mintát kanadai balzsammal készítjük el, hogy megfigyeljük.

toxicitás

Szerencsére a szafranin olyan festék, amely nem jelent veszélyt azok számára, akik kezelik. Ártalmatlan színezék, rákkeltő és nem tűzveszélyes.

A bőrrel vagy a nyálkahártyával való közvetlen érintkezés enyhén bőrpírot okozhat a környéken, komoly komplikációk nélkül. Ennek érdekében ajánlott az érintett területet bő vízzel mossa le.

Irodalom

1. García H. Colorante safranina O. Egészségügyi szakember, 2012; 1 (2): 83-85. Elérhető a következő oldalon: medigraphic.com
2. Gil M. Gram folt: alapok, anyagok, technika és felhasználás. 2019. Elérhető a következő webhelyen: lifeder.com
3. Gil M. Spore festés: indoklás, technikák és felhasználások. 2019. Elérhető a következő webhelyen: lifeder.com
4. Safranina. " Wikipédia, a szabad enciklopédia. 2017. március 7., 10:39 UTC. 2019. augusztus 3., 20:49 en.wikipedia.org
5. Pérez-Cortéz S, B Vera, Sánchez C. Hasznos festési technika a Gracilariopsis tenuifronok és a Gracilaria chilensis (Rhodophyta) anatómiai értelmezésében. Act Bot. Venez. 2003; 26 (2): 237-244. Elérhető a scielo.org oldalon.
6. Aleika templom, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, J Milián, Matos Madyu. A xylem erek funkcionalitásának és a Leifsonia xyli subsp. xyli. Veg védelme. 2007-ben; 22 (1): 65-65. Elérhető a következő címen: scielo.sld