A cetrimid agar vagy cetrimid egy szelektív szilárd táptalaj, amelyet a Pseudomonas aeruginosa izolálására terveztek. A faj jellegzetes pigmentek előállításának bemutatására épül, és King, Ward és Raney által készített Tech agar módosítása alapján készült.
Az eredeti formula magnézium-klorid, kálium-szulfát sóit, a zselatin hasnyálmirigy-emésztését és agar-agart tartalmazott. A képlet módosítása cetrimid (cetil-trimetil-ammónium-bromid) és glicerin hozzáadásából áll.
Cetrimid agar, amelyet a Pseudomonas aeruginosa-val vettek be Forrás: BiotechMichael, a Wikimedia Commonsból
A cetrimid-agar hasznos olyan minták mikrobiológiai vizsgálatához, amelyekben feltételezik a Pseudomonas aeruginosa jelenlétét. Meg kell jegyezni, hogy ez a baktérium rendkívül fontos, mivel bár a normál környezeti mikrobiota része, gyakran opportunista kórokozóként viselkedik.
Ezért a csíra által okozott egyik leggyakoribb probléma a nozokomiális fertőzések, azaz azok, amelyek a kórházi környezetben fordulnak elő, és a depressziós immunrendszerrel rendelkező betegeket támadják meg.
Másrészről, annak a affinitásnak köszönhetően, amelyet ezen a mikroorganizmuson a nedvességtől függ, a legsebezhetőbb szennyeződési célok a következők: segített légzőkészülékek, gyógyszerek, porlasztók, vízforrások, légkondicionálók, fertőtlenítőszerek, szappanos oldatok, injekciós oldatok, nyitott sebek, katéterek, húgycsövek, többek között.
Ebben az értelemben a cetrimid-agar hasznos mikrobiológiai kontrollok és tenyésztések végrehajtására az előzőekben említett elemeknél.
bázis
A cetrimid-agar azon alapul, hogy a tápközeg elősegíti a P. aeruginosa növekedését, serkenti pigmentjeinek képződését, és ezáltal gátolja más mikroorganizmusok szaporodását.
Ezek a tulajdonságok az egyes alkotóelemek működéséből adódnak. A jelen lévő zselatinpepton nitrogén, vitaminok és ásványi anyagok forrásaként szolgál. A glicerin vagy a glicerin szénforrásként működik.
A cetrimid (cetil-trimetil-ammónium-bromid) maga a szer, amely gátolja a P. aeruginosa-tól eltérõ baktériumok növekedését, beleértve az azonos nemzetségbe tartozó többi fajt is.
A gátlás azért következik be, mert a ceramid kationos mosószerként működik, és a legtöbb baktérium plazmamembránját destabilizálja. Ez kivétel a P. aeruginosa-tól és néhánytól, amelyek fennmaradnak.
Másrészt magnézium-kloridot és kálium-szulfátot tartalmaz. Ezek a vegyületek serkentik a fenotípusos expressziót, amely a Pseudomonas aeruginosa különböző pigmentek előállításának képességéhez kapcsolódik, ideértve a következőket: pyocyanin, pyoverdin, pyorrubin, pyomelanin és fluoreszcein. Végül agar-agart tartalmaz, amely szilárd állagot biztosít.
Értelmezés
Az agarban nyert növekedés értelmezése a következő:
A szabályos élekkel rendelkező, kerek, sima telepek megfigyelése kék-zöldes, zöld, barna vagy vöröses pigmentek előállításával, valamint a gyümölcsös szag (aminoacetofenon) kibocsátásával feltételezhető eredménye ennek a baktériumnak az említett mintában való jelenléte.
Másrészről, a fényes zöldessárga pigment megfigyelése a telepeken a P. aeruginosa jelzésére utal, amikor a lemezt ultraibolya fénynek teszik ki.
A P. aeruginosa kolóniák fluoreszcenciája cetrimid agaron ultraibolya fényben.
Meg kell jegyezni, hogy az egyes megfigyelt színek egy adott pigment előállításának következményei. A kék-zöld pigment a pyocyanin, a zöld - pyoverdin, a vöröses - a pyorubin, a barnát - és a pyomelanine, valamint az élénk sárga-zöld fluoreszcenciának felel meg.
Készítmény
Mérjünk ki 43 g dehidratált közeget és oldjuk desztillált vízben. Adjunk hozzá 10 ml glicerint. Vigye a keveréket hőforrásba. Hagyja néhány percig forralni, amíg a teljes feloldódáshoz nem fordul.
Autokláv 121 ° C-on 15 percig. Hagyjuk állni, és steril Petri-csészékben tálaljuk, amikor a hőmérséklet 50 ° C körüli.
Hagyja megszilárdulni, fordított sorrendben elrendezi a plakkókban, és felhasználásig tárolja a hűtőszekrényben. A Cetrimide agarlemezeket a vetés elõtt el kell távolítani a hûtõbõl és hagyjuk szobahõmérsékletre melegedni.
A tápközeg végső pH-jának 7,2 ± 0,2-nek kell lennie.
A dehidrált közeg bézs színű, a készítmény átlátszatlan fehér.
Alkalmazások
A cetrimid-agarba be lehet vetni minden olyan mintát, amelyben feltételezhető Pseudomonas aeruginosa jelenléte. Ezért hasznos a mikrobiológia minden területén (környezeti, ipari, klinikai, víz és élelmiszer).
Nagyon fontos, hogy elemezze a kórházi környezetet, és így képes legyen alkalmazni a korrekciós intézkedéseket, mivel ez a mikroorganizmus a beteg által használt szennyezett eszközök, gyógyszerek, oldatok és kellékek útján érinti el a betegeket.
Ily módon a mikroorganizmus megfertőzheti az immunszuppresszált betegek alsó légzőrendszerét, húgyúti és sebeit.
A P. aeruginosa kolóniaszámát mikrobiális határvizsgálatokkal is elvégezhetjük.
elvetett
A cetrimid-agar alkalmazható elsődleges tenyészetként. A lemezt az egyik szélére oltják be, és onnan kimerítéssel osztják el a lemez többi részéhez. A folyékony mintákat felületre vethetjük egy drigalski spatulával.
A lemezeket aerob módon inkubáljuk 37 ° C-on, 24 órán át.
korlátozások
-A Pseudomonas aeruginosas törzsek kis százaléka nem termel pyocyanint, tehát hamis negatív értelmezhető.
- Néhány klinikai jelentőségű Pseudomonas faj gátolt ebben a közegben.
- Annak ellenére, hogy megfigyeljük a Pseudomonas aeruginosa tulajdonságait, ezeket további azonosítási vizsgálatokkal meg kell erősíteni. Az a vizsgálat, amelyet nem szabad kihagyni, az oxidáz-teszt, ennek pozitívnak kell lennie.
- Bizonyos Enterobacteriaceae nőhet ebben a közegben és kialakulhat egy sárga pigment, de abban különbözik a Pseudomonas aeruginosa-tól, hogy amikor a lemezt ultraibolya fénynek vetik alá, akkor nincs fluoreszcencia.
- A Serratia marcescens képes kifejleszteni és rózsaszínű pigmentet állít elő.
-Ha a cetrimid-agarral oltott lemezeket szobahőmérsékleten egy ideig ki vannak téve, a P. aeruginosa törzsek elveszíthetik az ultraibolya fényben megfigyelt fluoreszcenciát, azonban a tulajdonság helyreáll, ha 37 ° C-on ismét inkubálják.
QA
A cetrimid-agar jó teljesítményének elemzésére olyan kontroll törzseket használhatunk, mint például: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 és Staphylococcus aureus ATCC 25923.
A várt eredmények:
- Jó növekedés a P. aeruginosa számára, kék-zöld pigmentet és pozitív fluoreszceint tartalmaz.
- Az S. maltophilia és az S. aureus részlegesen vagy teljesen gátolódni fog.
- Az Escherichia coli várhatóan teljes mértékben gátolja.
Irodalom
- Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. A Pseudomonas aeruginosa klinikai izolátumainak fenotípusos és szerológiai jellemzése. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
- Conda Pronadisa Laboratories. Cetrimid agar alap. 2014.Lehető: condalab.com
- Britannia Laboratories. Cetrimide agar. 2015.Attól elérhető: britanialab.com
- BD Laboratories. BD ál állati agar (Cetrimide agar). 2013. Elérhető a következő oldalon: bd.com
- Francisco Soria Melguizo Laboratory, CA, Cetrimide agar. 2009.Támogatható: