TÁPLÁLÓ AGAR: INDOKLÁS, ELŐÁLLÍTÁS ÉS FELHASZNÁLÁSOK - BIOLÓGIA - 2026

A tápanyag agar nem szelektív táptalaj, és nincs különbség a szilárd tenyészettel. Ebben a közegben mindenféle baktérium nő, amely táplálkozási szempontból nem igényes.

Ez egy egyszerű táptalaj, és neve ellenére alacsonyabb táplálkozási értéket tartalmaz, összehasonlítva más hasonló közegekkel, mint például agyszív infúziós agar vagy a Trypticase szója agar.

A kolónia számít a tápanyag agarnak

Használata a laboratóriumban nagyon változatos. Főleg fajok altenyésztésére, törzsek fenntartására, kolóniák számlálására szolgál, többek között a vér agar előállításának alapjául.

Hasonlóképpen, világos bézs színük miatt kivételesen megkülönböztethetők egyes baktériumtörzsek által termelt pigmentek, például a Pseudomonas aeruginosa zöldes pigmente, a Serratia marcescens szobahőmérsékleten előállított téglavörös pigmente, a Staphylococcus aranysárga pigmente. aureus, többek között.

Ezenkívül ez az egyik legolcsóbb növekvő táptalaj a piacon.

bázis

Mint fentebb már említettük, ez egy nagyon egyszerű táptalaj, amely táplálékot szolgáltat a baktériumok növekedéséhez korlátozás nélkül és értelmezési komplex reakciók nélkül.

Mivel a táptalaj áttetsző, ideális a kolóniák mélységi módszerrel történő megszámlálására.

Fogalmazás

Főleg húskivonatból vagy élesztőkivonatból, peptonokból vagy hasnyálmirigy zselatin emésztésből, agar-agarból, nátrium-kloridból és desztillált vízből áll.

A hús vagy élesztő kivonat és a peptonok jelentik a szén és ásványi anyagok (nitrogén, foszfor és kén) nélkülözhetetlen forrásait, amelyeket a baktériumok energiaforrásként és növekedési tényezőkként használnak fel.

Hasonlóképpen, az agar-agar az összes szilárd táptalaj alapja, amely helyettesíti a zselatint, amely az első bázikus vegyület, amelyet Robert Koch használt, hogy szilárd állagot biztosítson a táptalajon.

Az agar egy poliszacharid, amely galaktózt, galaktomannánt, agarózt és agaropektint tartalmaz. 40 ° C-ra áll, és 100 ° C-ig olvad.

A nátrium-klorid a maga részéről biztosítja a baktériumok fejlődéséhez szükséges ozmolaritást.

Végül a víz szolgál a liofilizált vegyületek hidratálására és feloldására. Semleges pH-ra beállított desztillált vizet kell használni. Csapvizet nem szabad használni, mert kalciumot és magnéziumot tartalmaz, amely képes reagálni a közegben lévő foszfátokkal és oldhatatlan sókat képezhet.

Készítmény

Egy liter tápanyaggal szemben 31 g dehidratált tápközeget meg kell mérni. Helyezzük egy lombikba, és oldjuk fel egy liter desztillált vízben. 5 perc állást követően melegítjük egy hőforrás fölött, és folyamatosan keverjük, amíg forralni nem kezd 1 vagy 2 percig.

A tápközeg elkészítése.

A lombikot ezután autoklávba helyezzük, és 121 ° C-on 20 percig sterilizáljuk.

Sterilizálás autoklávban

Az idő végén eltávolítják az autoklávból és steril Petri-csészékben szolgálják fel, lamináris áramlású burkolat vagy a Bunsen égő segítségével.

Ha a Petri-csészék egyszer használatosak (műanyag), akkor a tápközeget el kell osztani, amikor az agar hőmérséklete megközelítőleg 50 ° C, hogy megakadályozzuk őket a túlzott hő hatására.

Hagyjuk megszilárdulni, és fordított lemeztartón tároljuk, és használatig 2-8 ° C-on hűtsük.

A lemezeket a vetés előtt meg kell edzeni. A tápanyag-agarlemezeket nem szabad használni, ha szennyezettek vagy kiszáradtak.

Az elkészített közeg pH-ját 7,3 ± 0,2-re kell beállítani.

Alkalmazások

Ez a mikrobiológiai laboratóriumban alkalmazott legegyszerűbb táptalaj. Készítmény kiválóan alkalmas a nem igényes baktériumok szaporodására.

Fő felhasználását az alábbiakban ismertetjük:

A vér agar előállításának alapja

Ezt a tápközeget néha alapként használják a vér agar előállításához, azonban nem ez a leggyakrabban használt bázis.

Ösztönözze a spórát alkotó baktériumok sporulációját

Ez a tápközeg különösen hasznos a spórákat alkotó baktériumok, például a Bacillus sp.

Ehhez egy Bacillus nemzetség törzsét vetettük be és inkubáltuk 24 órán keresztül 37 ° C-on aerobiosis alatt. Miután a telepek megnövekedtek, a lemezt hőmérséklet-stressznek vetik alá, vagyis a sütő hőmérsékletét 44 ° C-ra emelik, és további 24 órán át hagyják, vagy 24 órán át hűtőszekrényben helyezik.

Az idő végén a tenyészet kenetét elkészítjük és megfestjük Gram vagy Shaeffer-Fulton spórafestékkel. Endospórákkal (a bacilluson belüli spórákkal) és exospórákkal (a bacilluson kívüli spórákkal) rendelkező bacillákat figyelünk meg.

Nyúlás fenntartása

Egyes kutatási vagy egyetemi oktatási támogató laboratóriumok megkövetelik a klinikai jelentőségű életképes baktériumok minél hosszabb ideig tartását, annak érdekében, hogy a baktériumok bankját (bakterioteca) felhasználhassák kutatási munkákhoz vagy oktatási gyakorlatok előkészítéséhez, ahol a A hallgatók megtanulják manipulálni és azonosítani ezeket a mikroorganizmusokat.

Erre a célra tápanyag-agar, valamint agyszív-infúziós agar használható. Az agart elkészítjük, bakelit fedővel ellátott csövekbe öntjük és egy alapra billentetjük oly módon, hogy az agar megszilárduljon, alján blokkot képezzen, és a felületén ferdén alakú (fuvolacsőrű).

Minden csövet fel kell tüntetni a beoltandó baktériumok nevével és a dátummal. Mindegyik baktériumot be kell vetni a kúpra és inkubálják 24 órán át, amint a telepek megnövekednek, a csöveket szobahőmérsékleten tárolják.

A bakterioteca-t 1-3 hónapra kell megújítani, hogy elkerüljük a táptalaj szennyeződését és kiszáradását, valamint a baktériumok elpusztulását.

Csak nem válogatós baktériumok tarthatók fenn ilyen módon.

Telepek száma

Noha vannak speciális eszközök a kolóniák számlálására, mint például a szokásos agar, a tápanyag-agart erre a célra lehet használni, akár drigalski-spatulával történő felszíni vetéssel, akár mélységgel. Ezért nagyon hasznos az élelmiszerek és a víz mikrobiológiai elemzésében.

Diagnosztikai tesztek futtatása

Mivel ez egy olyan táptalaj, amely nem tartalmaz vért vagy más adalékanyagot, ideális az ezen a táptalajon termesztett telepek kimutatására a kataláz teszt elvégzésére.

Hasonlóképpen, világos színének köszönhetően oxidáz-teszteket kell elvégezni közvetlenül a beoltott agar területén interferencia nélkül.

Mezofil aerobok visszanyerése az aktív sós vizekből (Strandok)

A 10% tengervízzel készített tápanyag agar hasznos a mezofil aerobok értékeléséhez a tengerparti vizekben.

Ilyen módon felmérhető a vizek valódi szennyezettségi szintje ezekkel a mikroorganizmusokkal, mivel az ilyen típusú mintákban az eredmények átfedésben vannak, ha a szokásos módon előállított tápközeget használjuk.

Ezt Cortez et al. 2013-ban egy kutatási munkában.

Ez azzal magyarázható, hogy a baktériumok hirtelen változásokon mennek keresztül, ha a túlzott sós környezetből az alacsony sótartalmú környezetbe kerülnek, ezért a mikroorganizmusok letargiás állapotba lépnek, amelyben életképesek, de nem termeszthetők.

Irodalom

1. "Tápláló agar." Wikipédia, a szabad enciklopédia. 2016. szeptember 13, 20:33 UTC. 2018. december 29., 21:04 en.wikipedia.org
2. Forbes B., Sahm D., Weissfeld A. (2009). Bailey és Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Argentína. Szerkesztő Panamericana SA
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiológiai diagnózis. (5. kiadás). Argentína, szerkesztõ Panamericana SA
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Tengeri vízzel készített táptalajok hatása a chichirivichei, Falcón állam, Venezuela, Chichiriviche gyógyfürdőjeinek tengeri vizeinek egészségügyi mutatóira. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M és Cardoso M. A víz mikrobiológiai minősége adagolás céljából, sertések számára. Cient.Agro.Amaz. 2013 1 (2): 42-49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Gyakorlati klinikai mikrobiológia. Cadizi Egyetem, 2. kiadás. UCA Kiadványok Szolgálata.