A Salmonella Shigella, más néven SS agar néven ismert szelektív és differenciális közeg: kifejezetten a Salmonella és Shigella nemzetség enteropatogén baktériumainak izolálására tervezték, mindkét környezeti minta, például klinikai.
Az SS agar komplex összetételű; Húskivonatból, peptonból, laktózból, epesókból, nátrium-citrátból, nátrium-tioszulfátból, vas-citrátból, agarból, semleges vörösből, élénkzöldből és desztillált vízből áll. Nagy szelektivitása miatt a bőséges vegyes növényvilággal rendelkező mintákat be lehet vetni.
SS agar Salmonella sp. Forrás: Manurx27, a Wikimedia Commonsból
A mikrobiológiai laboratóriumokban a Salmonella-Shigella táptalajt széles körben használják a salmonella és a Shigella jelenlétének megvizsgálására hasmenéses székletmintákban, szennyvízben, ivóvízben és ételekben.
Időnként elődúsító táptalagokat (laktózleves) és dúsító levest (szelenit-cisztin leves) kell használni a Salmonella törzsek kinyerésére.
Ezeket a lépéseket akkor kell elvégezni, ha gyanú merül fel a nagyon alacsony mennyiségű szalmonella fennállásáról vagy ha a törzset ipari termelési folyamatok, főként feldolgozott élelmiszerek visszaélésével lehet visszaélni. Ezenkívül tanácsos az antibiotikumokkal kezelt betegek székletmintáinak dúsítása.
Ezt követően a dúsított táptalaj beoltható Salmonella-Shigella agarra és más hasonló táptalajokra, például xilóz-agarra, lizin-dezoxikoiátra (XLD) és bélben oldódó Hektoen agarra (HE).
bázis
A Salmonella-Shigella tenyésztő tápközeg mindegyik alkotóeleme sajátos funkcióval rendelkezik, és a keverék egésze biztosítja a jellemző tulajdonságokat.
Tápláló erő
A húskivonat és a pepton (kazeinnel és állati szövetekkel emésztve) biztosítják a szükséges tápanyagokat (nitrogének, szén és vitaminok) a mikroorganizmusok kifejlődéséhez, amelyek képesek tolerálni a többi alkotórészt.
Következetesség
Az agar-agar felelős a közeg szilárd állandóságáért.
Szelektív
Ez a táptalaj nagyon szelektív, mivel epe sókat, nátrium-citrátot és élénkzöldet tartalmaz. Ezért gátolja az összes gram-pozitív baktérium és a legtöbb gram-negatív baktérium növekedését, ideértve néhány koliformust is.
Míg a Salmonella nemzetségbe tartozó baktériumok és egyes Shigella törzsek támogatják ezeket a vegyületeket.
Elsősorban a Salmonella nemzetsége nagyon ellenálló az epesókkal, annyira, hogy képesek olyan hordozó betegek epehólyagjában élni, akik állandóan a baktériumokat székletükbe öntözik.
Differenciális
A laktóz az erjeszthető szénhidrát, amely elősegíti a laktóz-erjesztő törzsek megkülönböztetését a nem erjesztő törzsektől. Ezt a tulajdonságot a pH-mutató jelenléte bizonyítja, amely ebben a közegben fenolvörös.
A laktózos erjesztő törzsek vörös telepeket eredményeznek, míg a nem erjesztő törzsek színtelenek. Ez a tulajdonság fontos, mivel a Salmonella és a Shigella nem erjesztik a laktózt.
Másrészt, ez a közeg nátrium-tioszulfátot tartalmaz szulfid forrásként, és vas-citrátot mint vas forrást. Mindkét vegyület képes megkülönböztetni a hidrogén-szulfid előállítására képes baktériumokat. Ezek reagálva látható, oldhatatlan, fekete vas-szulfid csapadékot képeznek.
Ez a tulajdonság a Salmonella nemzetség egyes törzseiben található. Általában kolóniáik sík, színtelenek, középen fekete pont található. A többi Salmonellák nem termelnek H 2 S és fejleszteni, mint színtelen telepek.
Másrészt a Shigella nemzetség kolóniái sík, színtelenek, feketézés nélkül.
Készítmény
Ezt a közeget nagyon egyszerű elkészíteni.
Mérjünk ki 63 g dehidrált kereskedelmi közeget és oldjuk fel liter desztillált vízben. Az oldatot melegítsük és keverjük. A keverék forralhat akár percig.
Ezt a közeget nem szabad autoklávozni. Feloldódás után közvetlenül egy vagy kettős steril lemezeken szolgálják fel.
Amikor megszilárdulnak, fordított módon elrendezik a vérlemezkékre, és felhasználásig hűtőszekrényben (2-8 ° C) tárolják.
Az előkészítés után a táptalaj pH-jának 7,2 ± 0,2 pH-n kell maradnia, és narancssárga-vörös színűnek kell lennie.
Fontos, hogy a lemezek melegedjenek a minták vetése előtt. Az eredeti mintát közvetlenül el lehet vetni, az agar egy részére az anyagot ürítik, majd onnan kiszivárogtatják.
Dúsított húslevesek használata esetén tegyük át a szelenitleves egy részét és kocsazzunk egy drigalski spatulával.
Inkubáljuk 37 ° C-on 24 órán át aerobiosisban.
Ne feledje, hogy a lemért grammok száma és a táptalaj végső pH-ja kereskedelmi házonként változhat. A középső alap mindig előkészíti a jelzéseket.
Használat
Gyakran használják a széklettenyésztés elemzésében, valamint a szennyvíz, az ivóvíz és az élelmiszerminták mikrobiológiai vizsgálatában.
Gyakran kettős lemezeket készítünk, az egyik oldalra Salmonella-Shigella agart, a másik XLD agart viszünk fel.
korlátozások
-Néhány Shigella törzs nem növekszik ebben a közegben. Ezért nem ajánlott ennek a nemzetségnek az elsődleges izolálása.
-Minden átlátszó kolónia, amelynek fekete központja van, nem utal a szalmonellára; Biokémiai teszteket kell elvégezni a helyes azonosítás érdekében, mivel egyes Proteus törzsek telepei nem különböztethetők meg a szalmonella baktériumaitól.
-A dehidratált közegnek gondoskodnia kell a környezetnek való kitettségről, mivel nagyon higroszkópos. Ezért száraz és jól zárt környezetben kell tartani. Nagyon rövid ideig nyitva.
- A tápközegben lévő epessók időnként kicsapódhatnak, és hasonló képet képezhetnek az agarban, de ez nem befolyásolja az eredményeket.
-Néhány Shigella törzs lassan erjesztheti a laktózt.
QA
A táptalaj megfelelő működésének bizonyítása érdekében tanácsos ismert vagy tanúsított kontroll törzseket ültetni és megfigyelni, hogy a növekedés megfelel-e a várt tulajdonságoknak.
Ehhez E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium vagy Enterococcus faecalis törzsek használhatók.
A várt eredmények:
Enterobacter és Klebsiella ------ nagy kolóniák és vörös vagy rózsaszín mucoidák.
Shigella flexneri ---------- átlátszó vagy színtelen lapos telepek.
Salmonella typhimurium ------ színtelen telepek fekete központokkal.
Enterococcus faecalis -------- teljes gátlás.
Irodalom
- Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella agar. 2009.Támogatható: f-soria.es
- BD laboratórium. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Elérhető a következő oldalon: bd.com
- Britannia Laboratories. Salmonella-Shigella Agar. 2015.Attól elérhető: britanialab.com
- Valtek diagnosztika. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar), 2010. Elérhető az andinamedica.com oldalon
- Forbes B., Sahm D., Weissfeld A. (2009). Bailey és Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Szerkesztő Panamericana SA Argentina.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiológiai diagnózis. 5. kiadás Szerkesztő Panamericana SA Argentina.