TRYPTICASEIN SZÓJA AGAR: INDOKLÁS, ELŐÁLLÍTÁS ÉS FELHASZNÁLÁSOK - BIOLÓGIA - 2026

A szója-agar-tripton vagy a Trypticase-szója-agar szilárd táptalaj, táplálkozási szempontból nem szelektív. A TSA betűk jelölik az angol betűszó, Trypticase Soy Agar. Tripteinből, szójapeptonból, nátrium-kloridból és agar-agarból áll.

Magas táplálkozási ereje miatt ideális közepesen igényes és nem igényes mikroorganizmusok tenyésztésére. A kiegészítő táplálék nélküli tápközeget nem javasoljuk az elsődleges kultúrákhoz, de nagyon hasznos tiszta törzsek altenyésztésére és életképességének megőrzésére egyéb felhasználások mellett.

Trypticasein szója agar ékek bakelit sapkákkal ellátott csövekben. Forrás: A fotó készítette MSc. Marielsa Gil.

Ez az agar szintén szolgál dúsított közegek, például vér-agar előállításához, különösen akkor, ha a hemolízis mintázatainak megfigyelésére, valamint az optokin és a bacitracin taxonok felállítására van szükség, amely a Streptococcus pneumoniae és a Streptococcus pyogenes diagnosztizálásához szükséges.

Másrészt, ha antibiotikumokkal kombináljuk, akkor hasznos a klinikai szempontból fontos fakultatív és szigorú anaerob mikroorganizmusok izolálása a vegyes növényvilágú mintákból.

Végül, a trippticasein szója agar összetétele és teljesítménye megfelel a különböző gyógyszerkönyvek (európai, japán és észak-amerikai) által előírt követelményeknek.

bázis

A baktériumok megfelelő fejlődéséhez az energiaellátás, például aminosavak, vitaminok, puri és pirimid bázisok jelenléte szükséges.

Ebben az értelemben a triptein és a szójapepton biztosítja ezeket a tápanyagokat a mikroorganizmusokhoz, lehetővé téve ezek teljes fejlődését. Az igényes baktériumok esetében azonban ezt az agart ki kell egészíteni defibrillált vérrel vagy melegített vérrel, hogy növelje annak dúsítását.

Másrészt, ha antibiotikumokat adunk a tápközeghez, ez szelektív tápközeggé válik. 0,6% élesztõkivonat adható hozzá a Listeria nemhez tartozó fajok elkülönítésének elõsegítésére, míg a cystine tellurit és a bárányvére ideális a Corynebacterium diphteriae esetében.

Végül a nátrium-klorid biztosítja a táptalaj ozmotikus egyensúlyát, és az agar biztosítja a szilárd állagot.

Készítmény

Trypticasein szója agarlemezek

A tripta-pazin-szója-agar elkészítéséhez 40 g dehidratált kereskedelmi tápközeget kell digitálisan megmérni. Egy liter lombikban levő desztillált vízben oldjuk.

Az elegyet 5 percig hagyjuk pihenni, majd hőforrásba helyezzük, hogy elősegítsük a közeg feloldódását. Rendszeresen keverni kell, és 1-2 percig főzni. Ezt követően a tápközeget autoklávban 121 ° C-on 15 percig sterilizáljuk.

Hagyjuk lehűlni 50 ° C-ra, és osszuk el steril Petri-csészékbe. Hagyja megszilárdulni, fordított sorrendben elrendezi a plakkókban és tárolja a hűtőszekrényben.

A tápközeg végső pH-jának 7,3 ± 0,2-nek kell lennie.

Meg kell jegyezni, hogy a dehidrált táptalaj színe világos bézs színű, és 10–35 ° C között, száraz helyen kell tárolni.

A kész agar színe világoskék. Az elkészített lemezeket felhasználásig hűtőszekrényben (2-8 ° C) kell tárolni.

A lemezeknek használat előtt el kell érniük a szobahőmérsékletet.

Trypticasein szója agarlemezek vérrel kiegészítve

A vér-agar elkészítéséhez 5% -os defibrillált vért adagolunk a tripta-pazin-szója-agar 50 ° C-ra hűtésekor. Az elegyet enyhe mozdulatokkal forgatva homogenizáljuk.

Tálaljuk steril Petri-csészékben. A középső színnek cseresznyevörösnek kell lennie.

Trypticasein szója agar lemezek melegített vérrel kiegészítve

A TSA-alapú vér agar elkészítéséhez járjon el a már leírtak szerint, de az autokláv elhagyása után hagyja megpihenni, amíg a közeg hőmérséklete megközelítőleg 56–70 ° C között van. Ekkor a vért helyezik és keverik, amíg a táptalaj barnássá nem válik.

Tálaljuk steril Petri-csészékben. A közeg színe csokoládébarna.

Trypticasein szója agar ékek

Az agarkészítési eljárás megegyezik a lemezeken leírtakkal, azzal a különbséggel, hogy a tápközeg Petri-csészékre történő táplálásának helyett 10–12 ml között csövekben osztják el Bakelit borítókkal a sterilizálás előtt.

Ezt követően a csöveket autoklávozzuk 121 ° C-on 15 percig. Amikor távoznak, egy támasz segítségével döntik meg őket, és hagyják megszilárdulni.

Az előkészített ékeket felületük szerint vetik el, és bizonyos nemigényes mikroorganizmusok meghatározott időn át életképességének fenntartására szolgálnak.

Alkalmazások

A trippticasein szója agart a következő esetekben használják:

- Alapként szolgál a legtöbb laboratóriumban rutinszerűen alkalmazott klasszikus vér agar elkészítéséhez.

- Az igényes baktériumok izolálása.

-A hemolízis mintázatának megfigyelése.

-A diagnosztikai tesztek végrehajtása.

- Alapként speciális vér agar elkészítéséhez a Corynebacterium diphteriae számára, cisztin-tellurittal és bárányvérrel.

- Alapként bárányvér agar, valamint kanamicin-vankomicin előállításához anaerobok, különösen a Bacteroides sp.

- Nem igényes törzsek fenntartásához (Bacterioteca).

- Aerob mikrobiális szám a víz, a környezet, az élelmiszer és a kozmetikai minták mikrobiális határának vizsgálatakor.

elvetett

A mintákat közvetlenül a Trypticasein Soy Agar felületére lehet vetni, vérrel vagy más adalékanyagokkal kiegészítve. Kimerültség vet.

Míg a tripszicin-szója-agar lemezeket adalékanyagok nélkül általában használják a mikrobiális törzsek (baktériumok vagy élesztők) szubkultúrálására.

QA

Sterilitás ellenőrzése

A trippticasein szójabázis-agarral elkészített különböző táptalajok sterilitásának ellenőrzéséhez a következő ajánlott: minden egyes előkészített tételből 1 vagy 2 nem beoltott lemezt vagy csövet inkubáljunk 37 ° C-on 24 órán át, hogy bizonyítsuk sterilitásukat. Minden esetben növekedés nélkül kell maradnia.

Ha szennyeződés merül fel, a teljes tételt el kell dobni.

Növekedés kontroll

A következő baktériumtörzsek felhasználhatók a tripta-pazin-szója-agar megfelelő működésének vizsgálatára: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 és Enterococcus faecalis ATCC 29212.

A törzseket beoltjuk és aerob módon inkubáljuk 37 ° C-on 24 órán át.

A növekedésnek minden esetben kielégítőnek kell lennie.

Olyan gombák is felhasználhatók, mint a Candida albicans Complex ATCC 10231 és Aspergillus niger ATCC 16404. A jó növekedés mindkét törzs esetében várható.

A vérrel kiegészített tripsztazin-szója agar növekedés-szabályozása és hemolízis-mintája

Az ezzel az alappal készített vér agar megfelelő működésének ellenőrzésére a következő törzsek használhatók: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 és Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

Ezeket beoltják és 37 ° C-on, mikroaerofilitásban inkubálják 24 órán át.

A növekedésnek minden esetben kielégítőnek kell lennie, figyelembe véve, hogy a S. pyogenes esetében meg kell figyelni a béta-hemolízist (a kolónia körül zajló könnyű halogént), és az S. pneumoniae mindkét törzsében az alfa-hemolízist (a kolónia körül zöldes halogén) kell megfigyelni. telepek).

Irodalom

1. Wikipedia közreműködői. Trypticase agar vagyok. Wikipédia, a szabad enciklopédia. 2018. december 17., 15:47 UTC. Elérhető a következő oldalon:
2. Britannia Laboratories. Triptein szója agar. 2015.Attól elérhető: britanialab.com
3. Neogen Laboratories. Tryptic szója agar. Elérhető a következő címen: foodsafety.neogen.com
4. Forbes B., Sahm D., Weissfeld A. (2009). Bailey és Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Argentína. Szerkesztő Panamericana SA
5. BD Laboratories. Trypticase vagyok Agar. 2014. Elérhető a következő oldalon:.bd.com