A bizmut-szulfit-agar egy szilárd közepes szelektív és differenciált tenyészet, amelyet kifejezetten a Salmonella enterica alfajba tartozó enterica szerotípus Typhi izolálására alakítottak ki, a többi Salmonella faj mellett. A táptalajt BSA agar néven ismertetjük rövidítéseként az angol bizmut-szulfit-agarban.
A bizmut-szulfit-agar eredeti formuláját 1927-ben Wilson és Blair (Glucose Bismuth Sulphite Iron Medium) készítették; tartalmazott nátrium-szulfitot, glükózt, bizmut-oldatot, ammónium-citrátot, vas-szulfátot és agar-agart.
A Salmonella sp 48 órás inkubációjának növekedése bizmut-szulfit agaron. Forrás: Pixnio.com Szerző: Dr. WR Erving, USCDCP
Ma módosul az eredeti táptalaj, amely húskivonatból, hús- és kazeinpeptonokból, bizmut-szulfit-indikátorból, glükózból, dinátrium-foszfátból, vas-szulfátból, élénkzöldből és agar-agarból áll.
Számos módszer létezik a Salmonella fajok izolálására, de amikor a Typhi szerotípust visszanyerik, a bizmut-szulfit agarnak jelentős előnye van ezekkel szemben, mivel ezekben a mikroorganizmusokban általában nagyon kevés vagy egyáltalán nem regenerálódnak..
Az enteropatogének izolálásakor azonban egynél több tápközeget kell használni, mivel a bizmutszulfit-agar kevésbé hatásos a Salmonella más fajaira és a Shigella nemzetségre nézve, amelyek gátlottak vagy nagyon rosszul fejlõdnek. ebben az agarban.
Meg kell jegyezni, hogy a szalmonella fajok közül a Typhi szerotípus az emberek egyik legfontosabb enteropatogénje, ez az egyetlen tározója. Ez a szerófaj tífuszot, gastroenteritist, bakteriémiát és szeptikemiát okoz.
Ezért helyénvaló belefoglalni ezt az agart víz, ürülék vagy élelmezési minták elemzése során, amennyiben annak jelenléte gyanúja áll fenn.
bázis
A legtöbb táptalajhoz hasonlóan a bizmut-szulfit-agar tápanyagokat, például peptoneket és húskivonatot tartalmaz a baktériumok növekedésének elősegítésére. Hasonlóképpen, a glükóz energia és szénforrásként is szolgál.
Ezen a táptalajon azonban nem minden baktérium fog növekedni, mivel a bizmut-szulfit-agar szelektív táptalaj. Olyan vegyületeket tartalmaz, amelyek gátolják a Gram-pozitív mikroorganizmusok és bizonyos Gram-negatív baktériumok növekedését. Ezek a vegyületek: a bizmut szulfit indikátor és élénkzöld.
A dinátrium-foszfát a maga részéről fenntartja a közeg ozmolaritását és pH-ját.
Továbbá, bizmut-szulfit agar egy differenciál közepes jelenlétének köszönhetően a vas-szulfát, ami azt mutatja, a képződő H 2 S. A H 2 S által alkotott baktériumok reagál vas-szulfát és formák világosan látható oldhatatlan fekete csapadék.
Végül az agar-agar biztosítja a közeg szilárd állagát.
Készítmény
Mérjünk ki 52,3 g dehidrált közeget és oldjuk fel egy liter vízben. A keveréket melegítjük 1 percig forralva, gyakran keverve, amíg teljesen fel nem oldódik. Ne melegítse túl sokat. Ez a közeg nem autoklávozható, mert a szélsőséges hő károsítja a táptalajt.
Hagyja lehűlni 45 ° C-ra, és rázza fel, mielőtt steril Petri-csészékbe tálalná. Javasoljuk, hogy jó vastagságú lemezeket készítsen. Ehhez 25 ml-t kell önteni minden lemezre. Hagyja megszilárdulni. Mivel ez egy olyan közeg, amelyet nem sterilizálnak, normális az azonnali felhasználása.
A D'aoust által 1977-ben elvégzett tanulmány azonban kimutatta, hogy a Salmonella typhimurium és a Salmonella enteritidis jobban gyógyul, mint a bizmut-szulfit agar közepes korú, és ez nem befolyásolja a Typhi és Paratyphi B szerotípusok teljesítményét.
D'aoust azt ajánlja, hogy a lemezeket a hűtés 4. napján használják, bár figyelmezteti, hogy a közepes öregedéssel a szelektivitás csökken, és a Proteus vulgaris törzsek könnyebben fejlődnek ki.
Ezért erősen szennyezett mintákhoz, például széklethez, inkább frissen készített közeget kell használni. Egyébként használja az előkészítés 4. napján. Más szerzők azt javasolják, hogy a lemezeket előkészítésüket követő napon, a hűtőszekrényben tárolva használják.
Használat előtt a hűtött lemezeket meg kell edzeni. A tápközeg pH-jának 7,5 ± 0,2-nek kell lennie. A nyers táptalaj bézs, az elkészített táptalaj zöldes-szürke opál.
Alkalmazások
Az ebben a táptalajban ültethető minták között szerepel a széklet, az ivóvíz vagy a szennyvíz és az élelmiszer mintája.
Az izolátumok javítása érdekében javasoljuk, hogy végezzen elődúsítást laktóz-tápközeggel, majd tetrationát-húsleves vagy cisztin-szelenit-húsleves dúsítás után, mielőtt bizmutszulfit-agarra vetik.
A lemezeket 35 ° C ± 0,2 hőmérsékleten inkubáljuk 24–48 órán keresztül, aerobiosis közben.
A bizmut-szulfit-agar kolóniák jellemzői
A Salmonella Typhi kolóniákat általában ezen az agaron látják 24 órán belül, fekete közepén, élénkzöld halokkal körülvéve. Mivel 48 órán belül teljesen feketévé válnak a hidrogén-szulfid képződése miatt.
-Ez a közeg gátolja a Shigella nemzetség legtöbb faját.
- A Typhi és az S. arizonae nagyon hasonló kolóniákat hozhat létre.
-A coliform termelő H 2 S, mint például Proteus és Citrobacter termel telepeket hasonló a Salmonella, ezért szükséges elvégezni biokémiai azonosítási vizsgálatokat.
- Jó elválasztást kell elvégezni az izolált kolóniák elérése érdekében. Ez az egyetlen módja a Salmonella nemzetség nemzetségének jellemző tulajdonságainak megfigyelésére.
QA
A sterilitás ellenőrzése érdekében egy nem inokulált lemezt inkubálnak 37 ° C-on, várhatóan nincs növekedés vagy színváltozás.
A minőség-ellenőrzés érdekében ismert törzsek, például:
Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhi ATCC 19430, Shigella flexneri ATCC 12022, Enterococcus faecalis ATCC 29212.
Az Escherichia coli és a Shigella flexneri várhatóan részben gátolják a zöldes-barna és a barna kolóniák kialakulását. Mivel mindkét szalmonellának kiváló fejlõdésnek kell lennie a fémes fényű fekete kolóniákkal, és végül az Enterococcus faecalis-t teljesen gátolni kell.
Irodalom
- Wilson, W. és EM McV. Blair. Glükóz-bizmut-szulfit vasközeg felhasználása a B. typhosus és a B. proteus izolálására. The Journal of Hygiene, 1927; 26 (4), 374-391. A (z).jstor.org lapból származik
- D'aoust JY. A bizmut-szulfit-agar teljesítményének tárolási körülményeinek hatása. J Clin Microbiol. 1977 5 (2): 122–124. Elérhető itt: ncbi.nlm.nih.gov
- IVD laboratóriumok. Bizmut-szulfit agar a WILSON-BLAIR szerint. 2009.Támogatható: BismuthSulfitagar_span_Jan_2009% 20 (2).pdf
- Himedia Laboratories. Bizmut-szulfit-agar. 2017.Attól elérhető: himedialabs.com
- Forbes B., Sahm D., Weissfeld A. (2009). Bailey és Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Szerkesztő Panamericana SA Argentina.
- Morales R, de la Cruz D, Leyva G és Ybarra M. A Puebla városában, Miravalles-ben előállított nyers kecsketej bakteriológiai minősége. Rev Mex de Ing Quím 2012; 11 (1): 45-54