VILÁGOS ZÖLD AGAR: INDOKLÁS, ELŐKÉSZÍTÉS ÉS FELHASZNÁLÁSOK - BIOLÓGIA - 2026

A ragyogó zöld agar szilárd táptalaj, nagy szelektivitással. Kizárólag a Salmonella nemzetség törzseinek izolálására használják, de vannak kivételek, például a typhi és a paratyphi fajok, amelyek nem növekednek ezen a táptalajon.

A szalmonella nemzetet gyakran kutatják széklet-, víz- vagy élelmezési mintákban. Ebben az értelemben ez a közeg nagyon hasznos lehet. Ezt az agart 1925-ben Kristensen, Lester és Jurgens készítette, később Kauffmann módosította.

Világos zöld agar. Erjesztõ és nem erjedõ kolóniák. Forrás: MJ Richardson / Invisible Worlds kiállítás - 2012geograph.org.uk/photo/2815842 Creative Commons License.

Az állati szövetek peptikus emésztése során előforduló pluripeptonokból és a hasnyálmirigy kazein emésztéséből áll, élesztőkivonatot, nátrium-kloridot, laktózt, szacharózt, fenolvörös, élénkzöld és agar-agart tartalmaz.

Jellemzője, hogy a legtöbb baktérium számára meglehetősen szokatlan környezet, és elősegíti a szalmonella növekedését, bár egyes kolibakteriák képesek megmaradni benne, gyengén fejlődik.

Fontos megjegyezni, hogy a Shigella nemzetség nem növekszik ezen a táptalajon, a Salmonella typhimurium vagy a Salmonella paratyphi sem. Ezért, ha ezeket a mikroorganizmusokat el kívánja izolálni, más táptalajokat, például XLD agart kell használni.

bázis

Világos zöld agar

A tápközeget alkotó minden egyes alkotóelem sajátos funkciót tölt be, amely meghatározza az agar tulajdonságait és tulajdonságait.

A pluripeptonok és az élesztõkivonat tápanyagforrást jelentenek, amelybõl a mikroorganizmusok elveszik a fejlõdésükhöz szükséges nitrogént és ásványi anyagokat. A laktóz és a szacharóz az erjesztésre képes mikroorganizmusok energiaforrása.

Az élénkzöld gátló anyag megakadályozza a gram-pozitív baktériumok és a nagy számú gram-negatív mikroorganizmus növekedését.

A nátrium-klorid ozmotikus stabilitást biztosít a közeg számára. Míg a fenolvörös a pH-mutató, színe megváltozik, amikor a szénhidrátos erjedés során savgyártást észlelnek.

Ezen a táptalajon nem fermentáló laktóz- és szacharóz-kolóniák rózsaszínű vagy átlátszó fehér színűek, vörös háttérben. Például a Salmonella nemzetségbe tartozó baktériumok.

Míg az ezen a táptalajon növekedni képes laktóz- vagy szacharózfermentáló baktériumok zöldessárga alapon sárga-zöld vagy sárga-zöld kolóniák alakulnak ki. Például az Escherichia coli és a Klebsiella pneumoniae.

Világos zöld agar (BGA) variánsok

A fényes zöld agarnak más változatai is vannak; Novobiocin briliáns zöld glükóz (NBG) agar és Novobiocin briliáns zöld glicerin laktóz (NBGL) agar.

Novobiocin élénkzöld glükóz-agar

Trypticase szója-agart, vas-ammónium-citrátot, nátrium-tioszulfát-pentahidrátot, fenolvöröset, glükózt, élénkzöldet, novobiocint és desztillált vizet tartalmaz.

A szalmonella kolóniák székletmintákból történő izolálására használják.

Ebben az esetben az élénkzöld és a novobiocin gátló anyagok, amelyek megakadályozzák a gram-pozitív baktériumok és néhány gram-negatív mikroorganizmus növekedését.

A szulfid forrása a nátrium-tioszulfát, a vas-forrása pedig a vas-citrát, mindegyikre szükség van a hidrogén-szulfid-termelés feltárásához fekete vas-szulfid-csapadék képződésével.

A glükóz az erjeszthető szénhidrát, a fenolvörös pedig a pH-mutató.

Ezen a táptalajon a Salmonella kolóniák nagy méretben fejlődnek, fekete központjával, amelyet vöröses halo körül vesz körül, és egy jól látható terület követi. Néhány Citrobacter freundii törzs a Salmonellaéval azonos kolóniákat termel.

Novobiocin briliánszöld glicerin-laktóz-agar (NBGL)

Ez a táptalaj tripszikáz-szója-agart, vas-ammónium-citrátot, nátrium-tioszulfátot, laktózt, glicerint, élénkzöld, novobiocint és desztillált vizet tartalmaz.

A táptalaj és az előző tápközeg közötti különbség az, hogy a glükózt laktóz helyettesíti, glicerint és fenolvöröset nem használnak.

A tápközeget a Salmonella fajok izolálására is használják, a kolóniák feketévé válnak a hidrogén-szulfid képződése miatt.

Csak telepeket, amelyek nem termelnek savat glicerin vagy laktóz eléréséhez elegendő H ₂ S termelés, mert az alacsony pH megakadályozza az H ₂ S képződését. Ennek eredménye a színtelen telepeket a legtöbb faj Proteus és Citrobacter.

Készítmény

- Mérjünk be 58 gramm kereskedelmi forgalomban kapott dehidratált közeget. Adjunk hozzá egy liter átdesztillált vízhez. Keverje össze, hagyja állni néhány percig, és tegye az elegyet hőforrásra, amíg teljesen fel nem oldódik.

-Autokláv 121 ° C-on 15 percig, ne lépje túl a sterilizálási időt.

- Hagyja pihenni és forróan tálalja steril Petri-csészékben. A végső pH-nak 6,9 ± 0,2-nek kell lennie.

- Hagyja megszilárdulni, és használatig tárolja a hűtőszekrényben. Vetés előtt a lemezeket szobahőmérsékleten kell tartani.

- A porközeg zöld színű, és az előállított narancssárgás-barna vagy vöröses-zöld színű, a pH-tól és a kereskedelmi társaságtól függően. A nagyon barna szín azt jelzi, hogy az agar túlhevült.

- Amint az agar megszilárdult, nem ajánlott átdolgozni, mivel a táptalaj romlik.

Felhasználások / alkalmazások

Ezt a tápközeget többek között a székletmintákból és a tejtermékekből a Salmonella nemzetség törzseinek keresésére használják.

Mivel ez egy meglehetősen szokatlan környezet, tanácsos bőséges oltást vetni, ha a közvetlen mintát használják. Ellenkező esetben a példányok dúsítását és dúsítását meg kell tenni, mielőtt ebből a tápközegbe vetik.

Mivel a Salmonella egyes törzsei gátolják vagy nehézségek nélkül növekednek, tanácsos ezt a tápközeget más szalmonella szelektív agarral kísérni.

Minden tipikus szalmonella tulajdonságú kolóniát biokémiai vizsgálatoknak kell alávetni a végleges azonosítás céljából.

QA

Az élénk zöld agar tápközeg jó teljesítményének tesztelésére az ATCC törzsek felhasználhatók a fejlődésük megfigyelésére rajta.

A minőség-ellenőrzéshez leggyakrabban használt törzsek: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922, Shigella flexneri ATCC 12038, Staphylococcus.

Az első háromnak rózsaszínű vagy átlátszó fehér kolóniákat kell adnia piros alapon. Jó fejlődésű szalmonella és kevés vagy rendszeres növekedésű Proteus.

Klebsiella és Escherichia esetében sárga háttérrel rendelkező sárga-zöld kolóniák várhatók, Shigella és Staphylococcus esetében ezeket meg kell gátolni.

A dehidrált közeget szobahőmérsékleten, száraz helyen kell tárolni, mivel a közeg nagyon higroszkópos.

Irodalom

1. Laboratorio Difco Francisco Soria Melguizo SA Ragyogó zöld agar. 2009
2. Britannia laboratórium. Világos zöld agar. 2015.
3. BD laboratórium. BD briliáns zöld agar. 2013-ban.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiológiai diagnózis. (5. kiadás). Argentína, szerkesztõ Panamericana SA
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Bailey & Scott mikrobiológiai diagnosztika. 12 ed. Argentína. Szerkesztő Panamericana SA