VOGEL-JOHNSON AGAR: INDOKLÁS, ELŐKÉSZÍTÉS ÉS FELHASZNÁLÁSOK - BIOLÓGIA - 2026

A Vogel-Johnson agar tápközeg szelektív és differenciált tenyészet, amelyet kifejezetten a Staphylococcus aureus izolálására készítettek. Ezt a tápközeget Vogel és Johnson 1960-ban hozta létre a tello-glicin-agar módosítása alapján, amelyet Zebovitz, Evans és Niven 1955-ben fogalmazott meg.

A módosítás a közegben lévő mannit koncentrációjának növeléséből és egy pH-indikátor beépítéséből állt. A jelenlegi formula tripteinből, élesztő-kivonatból, mannitból, dikálium-foszfátból, lítium-kloridból, glicinből, fenolvörösből, agarból, 1% kálium-tellurát-oldatból és vízből áll.

Forrás: Pixinio.com/Laboratorio de la Clínica ProcreaTec. Flickr.

Meg kell jegyezni, hogy vannak más táptalajok is, mint például a Vogel-Johnson agar, amelyek szelektívek az S. aureus izolálására, mint például a sós mannit-agar és a Baird Parker-agar. Ebben az értelemben elmondható, hogy a Vogel-Johnson agar alapja a sós mannit-agar és a Baird Parker agar keveréke.

Az elsőben a S. aureus kolóniákat a mannit fermentálásával és a pH-mutató sárgára változtatásával lehet megkülönböztetni. Másrészt, a második esetben az S. aureus-t úgy jellemzi, hogy a telluritot telluriummá redukálja, és szürkéből fekete feletti kolóniákat képez. Mindkét tulajdonság megfigyelhető a Vogel-Johnson agarban.

Ez a táptalaj, hasonlóan a többi társához, felhasználható a Staphylococcus aureus kimutatására az élelmiszer-mintákban, az ipari termékek egészségügyi ellenőrzéseiben és a klinikai mintákban.

bázis

Tápanyag-ellátás

A Vogel-Johnson táptalaj tripteint és élesztõkivonatot tartalmaz; Mindkét anyag hosszú láncú aminosavakat szolgáltat, amelyek szén- és nitrogénforrásként szolgálnak a baktériumok növekedéséhez. Azon a táptalajon növekedni képes baktériumok fogják felvenni a tápanyagokat ezekből az anyagokból.

Szelektív erő

A Vogel-Johnson agar képes gátolni a gram-negatív baktériumok és még néhány gram-pozitív baktérium növekedését, elősegítve a koaguláz-pozitív sztafilokokkusz fejlődését. A gátló anyagok a kálium-tellurát, lítium-klorid és glicin.

Diferenciális teljesítmény

Azokat az anyagokat, amelyek ezt a differenciálközeget képezik, a mannit és a kálium-tellurit. A mannit szénhidrát, és amikor erjed, savak képződnek, amelyek a közeget vörösről sárgára változtatják, ami a vörös fenol pH-mutatója jelenlétének köszönhető.

Míg a színtelen tellurit, amikor szabad fémes telluriummá redukálják, sötétszürke-fekete színűvé válik.

A Staphylococcus aureus fermentálja a mannitot, és redukálja a telluritot a telluriummá. Ezért a S. aureus tipikus kolóniái ebben a közegben szürke vagy fekete színűek, körülötte sárga táptalaj.

Azok a baktériumok, amelyek ebben a táptalajban növekednek és nem csökkentik a telluritot vagy a fermentált mannitot, átlátszó kolóniákat alkotnak egy vörös színű közeggel körülvéve, még intenzívebbek, mint az eredeti szín, mivel a táptalaj lúgosítása peptonok alkalmazásával történik.

Másrészt, a baktériumok, amelyek csökkentik a telluritot, de nem erjesztik a mannitot, szürke vagy fekete kolóniákká válnak, mélyvörös közeggel körülvéve.

Ha a tápközeget kálium-tellurát hozzáadása nélkül állítanánk elő, akkor az S. aureus kolóniák sárga kolóniákként fejlődnének ki, körülbelül sárga táptalajjal körülvéve, mint a sós mannit-agarban.

Ozmotikus egyensúly és megszilárdító szer

A dikálium-foszfát fenntartja a közeg ozmotikus egyensúlyát, és a pH-t semlegesre állítja. 7.2. Amíg az agar szilárd állagot biztosít a táptalajhoz.

Készítmény

1 tömeg / térfogat% kálium-tellurát oldat

Ezt az oldatot nem tartalmazza a dehidratált közeg, mivel az nem autoklávban sterilizálható. Ezért külön készítik és hozzáadják a már sterilizált közeghez.

Néhány kereskedelmi ház eladja a használatra kész 1% -os kálium-tellurát oldatot. Ha laboratóriumban kíván készíteni, akkor járjon el az alábbiak szerint:

Mérjünk ki 1,0 g kálium-telluritot és mérjünk meg 100 ml desztillált vizet. Oldjuk fel a kálium-tellurit egy víz részében, majd töltsük be a vízmennyiséget 100 ml-ig. Sterilizáljuk az oldatot szűrési módszerrel.

Vogel-Johnson agar alapközeg

Mérjünk ki 60 gr dehidratált tápközeget, és oldjuk fel 1 liter desztillált vízben. Az elegyet forrásig melegítjük a teljes feloldódás elősegítésére. Az oldódás során a közeget gyakran keverjük.

Sterilizáljuk autoklávban 15 kiló nyomáson és 121 ° C-on 15 percig. Vegye ki az autoklávból és hagyja pihenni, amíg a közeg megközelíti a 45-50 ° C hőmérsékletet. Adjunk hozzá 20 ml korábban elkészített 1% -os kálium-tellurát oldatot.

Keverjük össze és öntsük steril Petri-csészékbe. Hagyja megszilárdulni, és fordított helyzetben rendelje meg a lemeztartókra, hogy később felhasználásig hűtőszekrényben tárolja.

Az elkészített táptalaj végső pH-jának 7,2 ± 0,2-nek kell lennie.

A minta vetése előtt várja meg, amíg a lemez eléri a szobahőmérsékletet.

Az elkészített táptalaj színe piros.

Használat

Noha bármilyen típusú mintában felhasználható az S. aureus izolálására, elsősorban gyógyszerészeti termékek, kozmetikumok és élelmiszerek mikrobiológiai elemzésére használják.

Ajánlatos, hogy az inokulum sűrű legyen. A vetés megtörténhet platina fogantyúval való pontozással vagy Drigalski spatulával történő felülettel.

A lemezeket 35–37 ° C-on inkubáljuk 24–48 órán át aerobiosis alatt.

QA

A következő kontroll törzsek használhatók a minőség-ellenőrzés elvégzésére a Vogel-Johnson táptalajon:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 vagy Proteus mirabilis ATCC 43071.

A várt eredmény a következő: az S. aureus törzsek esetében a sárga közeggel körülvett fekete kolóniákkal kielégítő növekedés. Az S. epidermidis esetében rendszeres növekedés átlátszó vagy fekete kolóniákkal, körülvett vörös közeggel.

Hasonlóképpen, a teljes gátlás várható az E. coli esetében, a részleges vagy teljes gátlás a Proteus mirabilis esetében; ha növekszik, akkor ezt óvatosan fogja megtenni, és a kolóniák feketék lesznek, piros színű körülvéve.

Irodalom

1. BD Laboratories. VJ (Vogel és Johnson Agar). 2006. Elérhető a következő oldalon: bd.com
2. Britannia Laboratories. Vogel- Johnson Agar. 2015.Attól elérhető: britanialab.com
3. Britannia Laboratories. Kálium-tellurát. 2015.Attól elérhető: britania.com
4. Himedia laboratórium. Vogel- Johnson Agar közepes. 2018. Elérhető a következő oldalon: himedialabs.com/TD/MU023.pdf
5. Vogel- Johnson Agar Base. Merck mikrobiológiai kézikönyv. 12. kiadás, 502–503. Elérhető itt: Felhasználók / Csapat / Letöltések
6. A Wikipédia közreműködői, "Ágar Vogel Johnson", a Wikipedia ingyenes enciklopédia, elérhető a következő oldalon: wikipedia.org.
7. Venezuelai Standard Covenin 1292-89. (1989). Élelmiszerek. A Staphylococcus aureus izolálása és felsorolása. Elérhető a következő címen: sencamer.gob.ve