XLD AGAR: INDOKLÁS, ELŐÁLLÍTÁS ÉS FELHASZNÁLÁSOK - BIOLÓGIA - 2026

Az XLD agar vagy a Xylose Lizine desoxycholate agar táptalaj szelektív és differenciált szilárd tenyészet az enteropatogének izolálására. Taylor megtervezte az XL agar (xilóz, lizin) formulát a Shigella nemzetség izolálásának javítása érdekében.

Megfigyelte, hogy ezt a nemzetet gátolták az enteropathogének izolálására szolgáló legtöbb táptalajban. Ezt követően nátrium-dezoxikolátot, nátrium-tioszulfátot és vas-ammónium-citrátot adunk hozzá, hogy növeljük szelektivitását. Ez a formula hasznosnak bizonyult mind a Shigella, mind a Salmonella izolálására.

A Shigella, a Salmonella és a coliform baktériumok különbségei XLD agaron. A. Shigella sp., B. Salmonella sp., C. Coliforms. Források: A. Írta: CDC / Amanda Moore, MT; Todd Parker, PhD; Audra Marsh, jóvoltából: Közegészségügyi Image Library B. https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/Salmonella_species_growing_on_XLD_agar_-_Showing_H2S_production_-_Detail.jpg C. Írta: CDC / Dr. JJ gazda, jóvoltából: Közegészségügyi Image Library

Az XLD agar élesztőkivonatból, nátrium-dezoxikolátból, xilózból, lizinből, laktózból, szacharózból, nátrium-tioszulfátból, vas-ammónium-citrátból, nátrium-kloridból, fenolvörösből és agarból áll. Az XLD Agar és az SS Agar duót a legtöbb bakteriológiai laboratóriumban használják Shigella és Salmonella székletminták vizsgálatához.

Más laboratóriumok a rendelkezésre álló lehetőségek között a CHROMagar Salmonella és az XLD agar kombinációját részesítik előnyben. Ezek a duók kettős Petri-csészében készíthetők. Az egyik oldalon az XLD agar, a másik oldalon a másik választott táptalaj helyezkedik el.

bázis

-Tápláló erő

Az XLD agar élesztőkivonattal rendelkezik, amely tápanyagforrásként szolgál az ezen az agaron növekvő mikroorganizmusok számára. Ezen túlmenően a szénhidrátok (xilóz, szacharóz és laktóz) jelenléte energiát nyújt a baktériumok számára, amelyek erjeszthetik őket.

-A közeg szelektivitása

Gátló anyagként nátrium-dezoxikolátot tartalmaz; Ez megakadályozza a gram-pozitív baktériumok szaporodását, szelektív karakterisztikát adva a táptalaj számára.

-Diferenciális erő

Tipikus Shigella kolóniák

Mint már említettük, az XLD agar xilózt tartalmaz; Ezt a szénhidrátot az összes baktérium fermentálja, amely ezen a tápközegen nő, kivéve a Shigella nemzetet.

Ez az egyik tulajdonság, amely megkülönböztető jellegét adja, mivel a Shigella kolóniákat a többitől megkülönböztetik vörös telepek kialakulása, míg a többi baktérium sárga kolóniákat hoz létre.

A szalmonella tipikus kolóniái

A Salmonella nemzetség a xilózt is fermentálja, kezdetben sárga kolóniákat generálva. A szénhidrát-xilóz kimerülése után azonban a lizint támadja meg a lizin-dekarboxiláz enzim miatt. A lizin dekarboxilezése lúgokat generál, amelyek a kolónia és a környező közeg színét az eredeti vörösre változtatják.

Ezt a viselkedést csak a Salmonella végzi, mivel a lizint dekarboxilező koliformák nem képesek lúgosítani a közeget. Ennek oka az, hogy a koliformák a jelenlévő laktózt és szacharózt is fermentálják; ezért a savak termelése nagyon magas, így a sárga kolónia marad ezekben a baktériumokban.

Meg kell jegyezni, hogy a Salmonella nem nem fermentálja a szacharózt vagy a laktózt.

H előállítása

XLD agar is lehetővé teszi kimutatására H ₂ S- termelő Salmonella fajok; Ehhez a kénforráshoz, amelyet a nátrium-tioszulfát képvisel, és egy reakciófejlesztőnek, amely vas-ammónium-citrát.

Ez utóbbi reagál H ₂ S (színtelen gáz), és így látható oldhatatlan fekete csapadék vas-szulfát. Ebben az értelemben a szalmonella telepek tulajdonságai pirosak lesznek, fekete központtal.

Meg kell jegyezni, hogy a H ₂ S -képző reakció fordul elő, a lúgos pH szükséges. Ezért más Enterobacteriaceae, hogy a forma H ₂ S nem tudnak vagy olyan rosszul ebben a környezetben, mivel a magas savtartalma fermentálásával állítottak elő a szénhidrátok gátolja vagy akadályozza a reakciót.

-Nátrium-klorid, agar és fenolvörös

Végül a nátrium-klorid fenntartja az ozmotikus egyensúlyt; az agar a megszilárdító szer, és a fenolvörös detektálja a pH-változásokat, megváltoztatva a telepek és a táptalaj színét.

Készítmény

Mérjünk ki 55 g dehidratált XLD tápközeget és oldjuk fel 1 liter vízben. Melegítsük és keverjük a keveréket, amíg el nem éri a forráspontot. Ne melegítse túl, mivel a hő károsítja a közeget, és csapadékot képez, amely megváltoztatja a tipikus kolóniák morfológiáját.

Ezt a közeget nem szabad autoklávozni. Feloldódáskor azt 50 ° C-os vízfürdőbe kell vezetni. Hűtéskor közvetlenül a Petri-csészékre kell tálalni. Egyszeri vagy dupla lemezekre önthetők. Megszilárdulni hagynak, és felhasználásig hűtőszekrényben tárolják.

Használat előtt be kell hűteni. Mivel ez nem steril táptalaj, javasoljuk, hogy a felhasználás időpontja előtt készítse el.

A tápközeg végső pH-jának 7,4 ± 0,2-nek kell lennie. Az elkészített táptalaj színe narancssárga-piros, áttetsző, csapadék nélkül.

Ha van Xylose Lizine (XL) base agar, hozzáadhat nátrium-dezoxikolátot, nátrium-tioszulfátot és vas-ammónium-citrátot. Ily módon megkapjuk az XLD agar formulát.

Alkalmazások

Az XLD agart az enteropatogének - elsősorban a Shigella nemzetség és másodlagosan a Salmonella nemzet - visszanyerésére használják. Hasznos a széklet-, víz- és ételminták értékeléséhez.

A minták típusai

Ürülék

A székletmintákat közvetlenül az XLD agarra lehet vetni, az anyag megfelelő eloszlása ​​révén izolált telepekhez juthat.

A szalmonella visszaszerzésének javítása érdekében az XLD agar a szalmonella dúsító közegből csíkozható.

Étel

Ételek esetén a Salmonella és a Shigella dúsító táptalajai felhasználhatók. A Salmonella esetében többek között szelenit-cisztin levest, élénkzöld tetrationát-levest használhat.

Shigella esetében Shigella táptalajon dúsíthatók 0,5 μl / ml novobiocinnel, 42 ° ± 1 ° C-on 16-20 órán át inkubálva.

Víz

A vízanalízis során többek között a membránszűrési technika és az XLD agar használata javasolt.

Ültetési és azonosítási feltételek

A beoltott közeget aerob módon inkubáljuk 35 ° C-on 24-48 órán át.

Megfigyeljük az egyes nemzetségek tipikus kolóniáit, a gyanús telepeket biokémiai vizsgálatoknak kell alávetni az azonosításukhoz.

QA

A tápközeg minőség-ellenőrzésének értékeléséhez a következő baktériumtörzsek használhatók: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella abony DSM 4224, Shigella flexneri ATCC 12022, Shigella sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus miCi9302, Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.

A Salmonella nemzetet vörös telepek fekete közepével vagy teljesen fekete telepek jelenléte jellemzi ezen a táptalajon. Mivel a Shigella nemzetségben a telepeknek vörösnek, azaz a táptalaj színének kell lennie.

Az Escherichia coli esetében várhatóan teljes vagy részleges gátlása van; ha növekszik, a kolóniák sárgák. A Proteus mirabilis esetében rossz növekedés várható rózsaszínű kolóniákkal, fekete központtal vagy anélkül. Végül a Klebsiella nemzetség sárga kolóniákként növekszik.

Végső gondolatok

Az XLD agart széles körben használják a bakteriológiai laboratóriumokban a Shigella regenerálódásának nagy hatékonysága érdekében, és jó eredményeket mutat a Salmonella nemzetségben is.

Rall és társai (2005) „Három dúsító táptalaj és öt szilárd táptalaj értékelése a baromfi szalmonella kimutatására” című munkájukban bemutatták a három vizsgált klasszikus tápközeg (élénk zöld agar, SS agar és XLD agar)ét., Az XLD agar volt a legjobb visszanyerési arány.

A visszanyerési százalékok a következők voltak: élénk zöld agar esetében 13,8%, SS esetében 27,6% és XLD esetén 34,5%. A 48% -os visszanyerésű Rambach-agart és a 79,3% -os CHROMagar-ot csak a kromogén táptalajok tették túl.

Irodalom

1. Élelmezésből származó betegségek. A vérhas. Elérhető az anmat.gov.ar oldalon
2. "XLD agar." Wikipédia, a szabad enciklopédia. 2019. február 9., 11:46 UTC. 2019. április 10., 19:25 a wikipedia.org
3. BBL Laboratories. CHROMagar Salmonella / BD XLD Agar (biplát), 2013. Elérhető: bd.com
4. Lab. Neogen. XLD agar. Elérhető a következő helyen: foodsafety.neogen
5. Francisco Soria Melguizo laboratórium. XLD Agar. Elérhető a következő címen:
6. Rall L, Rall R, Aragon C, Silva M. Három dúsító táptalaj és öt borító közeg értékelése a baromfi szalmonella kimutatására. Braz. J. Microbiol. 2005-ben; 36 (2): 147-150. A következő címen szerezhető be: scielo.br
7. Forbes B., Sahm D., Weissfeld A. (2009). Bailey és Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Szerkesztő Panamericana SA Argentina.