- bázis
- jellemzők
- Fogalmazás
- Használat
- Folyamat
- A kultúrák gombaszerkezeteinek festése
- Közvetlen biológiai mintafestés
- Csíracső festése a kórokozó azonosításában
- Laktophenol biztonsági adatlap
- Egészség
- Gyúlékonyság
- instabilitás
- Különleges veszélyek
- Irodalom
A laktofenolkék vagy kék pamutot egyetlen színű tulajdonságokkal állítják elő. Klinikai laboratóriumokban elsősorban gombás szerkezetek, például hifák, csíracsövek és spórák színezésére használják.
Segít bizonyos gombák feltételezett vagy előzetes diagnosztizálásában, azonban mindig tanácsos a diagnózist konkrétabb vizsgálatokkal, például biokémiai vagy szerológiai vizsgálatokkal megerősíteni.

A laktofenolkék folt, a laktofenolkékkel festett kenet grafikus ábrázolása, mikroszkóppal felszerelt készítmény. Forrás: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8
A laktofenol-kék tejsavból, anilin-kékből, glicerinből, fenolból és ionmentesített vízből áll. Készíthető laboratóriumban, vagy felhasználásra készen is megvásárolható. Az elkészítés után készen áll a felhasználásra, semmiképpen sem szabad hígítani, mivel ez a művelet szörnyű eredményeket fog eredményezni.
Komponenseinek koncentrációja ideálisvá teszi a gombás szerkezetek festését, mivel a fenol kiküszöböli a kísérő baktériumok mikrobiótáját, míg a tejsav védőfilmet képez a gombás szerkezet körül. Végül az anilinkék affinitással rendelkezik ahhoz, hogy tapadjon a gomba szerkezetéhez.
bázis
A laktofenolkékkel egy bizonyos mikológiai kultúra gombaszerkezeteit egyszerűen megfestik. Ez az egyszerű, mert csak egy színezéket használ.
A laktofenol-kék - a festésen kívül - a minta tisztítójaként is működik, a tejsav és a fenol együttes hatásának köszönhetően, továbbá a fenol kórokozóként viselkedik, és ezzel egyidejűleg megakadályozza a mikroorganizmus lízisét azáltal, hogy gátolja a hidrolitikus enzimeket. jelen lehet.
Míg a tejsav megőrzi a gomba szerkezetének morfológiáját.
Másrészről, az anilinkék tulajdonsága, hogy tapint vagy kötődjön kitint tartalmazó struktúrákhoz. A szerkezeteket világoskékkel festették.
Meg kell jegyezni, hogy a gombás mikroorganizmusok, különösen az öntőformák sejtfala kitint tartalmaz, ezért ez a festék ideális ezen mikroorganizmusok festésére.
jellemzők
A laktofenolkék oldat erősen savas, enyhén zavaros, világoskék színű vizes festék. Stabil marad, ha 15 ° C és 25 ° C között tárolja. A palackot megfelelően lezárva kell tartani. Bőrirritáló és maró hatású a bőrre és a nyálkahártyákra.
Fogalmazás
Az egy liter laktofenolkék előállítására szolgáló formula a következő:
-250 g / l tejsav
-1,0 g / L anilinkék vagy metilkék
-500 g / L glicerin
-250 g / L fenol
-250 ml ionmentesített vagy desztillált víz.
A fenolt feloldjuk az előzőleg felmelegített vízben. Tejsavat és glicerint adunk hozzá, és nagyon jól összekeverjük. Végül az anilin-kék feloldódik. Újra megkeveredik, és használatra kész.
A 80 ml laktofenol-kék oldat elkészítéséhez a következő adagokat kell felhasználni:
-20 g fenolkristályok
-20 ml tejsav
-40 ml glicerint vagy glicerint
-20 ml desztillált víz.
Használat
A gombaszerkezetek megfestésére és a mikroszkopikus szinten megfigyelt morfológiai tulajdonságokon keresztül a gomba feltételezhető diagnosztizálására szolgál.
Folyamat
A kultúrák gombaszerkezeteinek festése
- Vegyünk egy tiszta gombatenyészetet, amelynek szerkezetét be kell tartani.
- Előnyösen lamináris áramlású burkolatban vagy öngyújtó alatt, maszk és kesztyű használatával dolgozzon, mivel meg kell felelni a biológiai biztonsági előírásoknak, mivel a legtöbb penész könnyen elterjedhet a környezetben, és ezért veszélyt jelent a kezelő számára.
- Egy csepp laktofenolkék kerül a lemezen.
- Vágjon le egy kis négyzetet jó minőségű ragasztószalagról, és nagyon óvatosan rögzítse azt a hidegen sterilizált platina fogantyú végéhez.
- A platina fogantyút a gombás kolónia leginkább felszíni részéhez kell megközelíteni, és a tenyészetet nagyon óvatosan megérinti, pontosan ott, ahol a ragasztószalag található.
- Ezután a csúszdához veszik, és közvetlenül a laktofenolkék cseppjére helyezik, ügyelve arra, hogy a szalag tökéletesen meghosszabbodjon és a festékkel kenje meg. A platina fogantyút nagyon finoman eltávolítják.
- Egy újabb csepp laktofenolkék kerül a szalagra és egy fedőlapra. Ne gyakoroljon túl nagy nyomást, hogy ne pusztítsa el a gomba szerkezetét, mivel ezek rendkívül törékenyek. A színezéknek hagyni kell, hogy körülbelül 3-4 percig hatjon.
- Ezen idő eltelte után a készítmény készen áll mikroszkóp alatt történő megfigyelésre 10X vagy 40X nagyítással. Ha 100X megfigyelésre van szükség, merülőolajat kell használni.
- A gomba szerkezete általában kék színű, a dematiaceus gombák kivételével, amelyek megtartják jellegzetes barna színüket az ilyen típusú gomba esetében.
Közvetlen biológiai mintafestés
Ha közvetlen biológiai mintát, például köpködést, genomot, váladékot, szekréciót kell tanulmányozni, ezeknek előzetes eljárással kell rendelkezniük a minta fertőtlenítésére. Ehhez nátrium-hidroxid-oldatot használunk.
Hajminták esetén ezeket közvetlenül lehet festeni.
Számos érintett szőrt (összesen 10) vesznek a feltételezett tinea capitis sérülésekből (alopecikus területeken), és azokat egy diára helyezik (diánként 3-4 szőrszálakonként). Néhány csepp laktofenolkék tetejére kerül, és azonnal fedőlemezzel lefedik.
Fogja meg a lemezt csipesszel és óvatosan melegítse át egy égőn. Ehhez hajtson végre 3–4 gyors áthaladást a lángon. Figyelje meg a mikroszkópot 40x sebességgel, és keressen spórákat a hajon kívül vagy belül (ectothrix vagy endothrix). Ha szükséges, merítsen be merülőolajat és figyelje meg 100X-on.
Csíracső festése a kórokozó azonosításában
Miután a Candida albicans feltételezhető tenyészetét emberi szérumban 2-4 órán át inkubáltuk 37 ° C-on, az oldat egy részét vettük és laktofenolkékkel megfestettük. A készítményt mikroszkóp alatt megfigyeltük 40X-en. A csíracső jelen van és a blastospórák világoskék színűek.
Laktophenol biztonsági adatlap
A Nemzeti Tűzvédelmi Szövetség (NFPA) összeállítja a vegyi anyagok biztonsági adatlapját annak kockázata szempontjából, hogy azt különféle szempontok szerint képviseli, ezeket színes rombusz jelképezi, és 0-tól négy.
Az egészségügyi kockázatokat kék színben, a gyúlékonyságot piros színben, az instabilitást vagy a reaktivitást sárga színben, és a különleges veszélyeket fehér színben azonosítják.
Egészség
Az NFPA szerint a laktofenol-kék által jelentett egészségügyi kockázat 3. szint. Ez azt jelenti, hogy az anyag rendkívül veszélyes, ha lenyelik, vagy a bőrrel vagy a nyálkahártyával közvetlenül érintkeznek.
Erõsen maró és irritáló anyag.
Bőrrel és nyálkahártyákkal érintkezve súlyos égési sérüléseket okozhat.
Lenyelése esetén fejfájást, zavart, letargiát, eszméletvesztést, légzési leállást és akár halált is okozhat.
Gyúlékonyság
Az NFPA szerint a Lactophenol Blue gyúlékonysága 1. szintű. Ez azt jelenti, hogy csak akkor ég, ha 94 ° C felett melegítik.
instabilitás
Az NFPA szerint sorolva, 0 (nulla) szinten a reakcióképesség szempontjából. Ez azt jelenti, hogy nincs a reakcióképesség kockázata, vagyis kémiailag stabil anyag.
Különleges veszélyek
Nem jelent további különleges veszélyeket.
Irodalom
- SAR laboratórium. Lactophenol Blue. 2010. elérhető: labsar.com.
- Alkalmazott klinikai kémia laboratórium. Laktofenolkék. 2015. Elérhető a következő címen: cromakit.es
- Merck Laboratories. Lakofenol-kék mikroszkópia oldatban. 2017. Elérhető a következő oldalon: Felhasználók / Equipo / Letöltések
- Sürgősségi kártya. Lactophenol kék oldat a gombás festéshez. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Kolumbia. 2014. Elérhető a javeriana.edu.co oldalon
- González M, Diamont D, Gutiérrez B. Gombaszerkezetek növényi színezékekkel, mint szennyező anyagként történő festésének technikája. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Rendelkezésre álló: Redalyc.
- Laboratóriumi Himedia. Laktophenol pamut kék. 2017. elérhető: himedialabs.com
- Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, J színész, Dasgupta A. Biokémiai tesztek és festési technikák a mikrobiális azonosításhoz. Science Direct, 2017; 61-73. Elérhető a: Elsevier
