- ABO Csoport
- Természetes antitestek
- A vércsoporthoz kapcsolódó antigének és antitestek
- Az ABO-csoport összeférhetetlensége
- Kisebb antigének
- Kereszt immunitás
- Mi a keresztezés?
- bázis
- A keresztreakciók típusai
- Major crossmatch
- Kisebb keresztmetszet
- fázisai
- Technika
- Sós fázis
- Hőfázis
- Coombs fázis
- Irodalom
A Crossmatch számos laboratóriumi vizsgálatot végez annak meghatározására, hogy a donor vérkészítményei (főleg teljes vér és gömbcsomagolásban) összeegyeztethetőek-e a recipiens vérével.
Ez egy kiegészítő kiegészítő teszt az ABO kompatibilitás és az Rh tényező számára. A keresztezés egy másik oka az, hogy néha két egyén (donor-recipiens) azonos ABO- és Rh-csoporttal rendelkezik, de a vérük inkompatibilis.

Forrás: unsplash.com
Az ilyen összeférhetetlenség annak köszönhető, hogy a vörösvérsejtfehérjék egy sor antigénnek nevezett antitestek vannak jelen. Ezeket az antigéneket nem vizsgálják rutinszerűen, mivel a vércsoportra (ABO) és az Rh faktorra vonatkoznak.
Ennek oka az, hogy a kisebb antigének sokkal ritkábban fordulnak elő és változatos expresszióval rendelkeznek minden egyes egyénben, ezért gyakorlatilag lehetetlen őket kategóriákba csoportosítani, ahogyan ezt a csoport és az Rh tényező teszi.
Ehelyett a donor vörösvértesteket összekeverik a beteg szérumával (fő illesztési teszt) és a beteg vörösvérsejteket a donor szérummal (kisebb egyezési teszt) az antigén-antitest reakciók jelenlétének kimutatására.
Ha a beteg vagy a donor szérumában vannak antitestek a kisebb antigének ellen, akkor a teszt pozitívnak mondható, így a legtöbb esetben az adott vér egység nem transzfundálható.
ABO Csoport
A keresztreakciók teljes megértéséhez először ismernie kell a vércsoportok alapjait.
Ebben az értelemben a legfontosabb tudás, hogy a vért négy csoportba lehet sorolni: A, B, AB és O.
Ezeknek a csoportoknak a vörösvértestek felületén egy adott fehérjét (antigént) expresszálnak, amelyet idegen elemként azonosítanak egy másik csoport potenciális receptorának ellenanyagai.
A legmegdöbbentõbb dolog az antigén-antitest reakciókban a vér illesztésében az, hogy az ellenanyagok létezéséhez nincs szükség az antigén elõzetes expozíciójára. Ezt természetes ellenanyagoknak nevezik.
Természetes antitestek
Általában ahhoz, hogy antitestek létezzenek az egyén testében, szükséges, hogy az egyén fehérvérsejtjeit korábban ki lehessen téve az antigénnek.
Ez azt jelenti, hogy az idegen antigén és a szervezet közötti első kapcsolatfelvétel során nincs antitest, mivel ezek később, az első érintkezés után keletkeznek. Ezért lehetetlen, hogy az immunrendszer antitestekkel rendelkezzen például egy adott vírus ellen, ha a múltban nem volt kitéve annak.
A fenti kivétel az egyetlen anti-AB antigén. Ezekben az esetekben a személynek olyan antigén elleni antitestei vannak, amelyeknek vörösvérsejtjeik nem rendelkeznek, annak ellenére, hogy soha nem voltak kapcsolatban más személy vörösvértesteivel. Ezt természetes ellenanyagoknak nevezik.
A vércsoporthoz kapcsolódó antigének és antitestek
A vércsoportokat az ABO rendszer esetében specifikus antigének (A vagy B) jelenlétével határozzák meg a vörösvértestek membránján, ellentétben az eritrocita membránon lévő hiányzó antigén elleni antitestekkel.
Így az A vércsoporttal rendelkező személy A antigént expresszál vörösvérsejtjeinek felületén, míg a szérumban anti-B ellenanyagok vannak.
Éppen ellenkezőleg, a B csoportban szenvedő betegekben a B antigén megtalálható, míg az ellenanyagok anti-A.
Az AB vérben szenvedő betegeknek mind A-, mind B-antigénje van, tehát nincs antitest, mivel ez megsemmisítené az ember vörösvérsejtjeit.
Éppen ellenkezőleg, az O csoportban, ahol az eritrocita membrán nem tartalmaz a két antigén egyikét (sem A, sem B), míg a szérumban anti-A és anti-B antitestek vannak.
Az ABO-csoport összeférhetetlensége
A fentiekből az ABO vércsoportok kompatibilitása könnyen levezethető, mivel az eritrociták membránjának antigénjének ismeretével a szérumban lévő antitestek automatikusan ismertek. Tehát:
- Az A vér kompatibilis az A és az O csoporttal.
- A B vércsoport kompatibilis a B és az O vérrel.
- Az O csoportba tartozó emberek csak O vért kaphatnak (mivel anti-A és anti-B ellenanyagokkal rendelkeznek), bár vérüket minden más csoport problémamentesen veszi, mivel nincs antigénje.
- Végül. azok, akiknek AB vércsoportja van, vért kaphatnak minden más csoportból (A, B, O és természetesen AB), mivel nincs antitestük az egyik antigén ellen. Azonban csak az AB csoportba tartozó emberek kaphatnak AB-vért, mivel minden más csoportban vannak antitestek, amelyek elpusztítják ezeket a vörösvértesteket.
Kisebb antigének
Akárcsak az ABO-csoportoknál, a fehérje sorozat is megtalálható az eritrociták felületén, amelyek antigénekként működnek ugyanúgy, mint az ABO-csoport antigénei.
Ezek az antigének azonban nem minden egyénben vannak jelen. Ezek kombinációja heterogén és a penetráció (a fehérje expresszió szintje) változó, ezért lehetetlen osztályozni olyan csoportokba, mint amilyen az ABO és az Rh esetében. Itt kapja nevét a "kisebb antigének", más néven "alacsony előfordulású antigének" néven.
Bár ezek nem gyakoriak, előfordulhatnak természetes antitestek a kisebb antigének ellen. Közülük a legelterjedtebbek: Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb és Kidd. Mindannyian felelősek a nagyon súlyos hemolitikus és transzfúziós reakciókért.
Ezenkívül előfordulhat szenzibilizáció kisebb antigénekkel szemben, a korábbi érintkezés révén, akár az említett antigénfehérjékkel a korábbi transzfúziók miatt, akár a kereszt immunitás miatt.
Kereszt immunitás
Azt mondják, hogy akkor van keresztirányú immunitás, ha két különböző forrásból származó két antigén (például egy vörösvértestek és egy baktérium) nagyon hasonlóak, arra a pontra, hogy ezen antigénfehérjék egyikének ellenanyagai szintén reagálnak a másikval, mert szinte azonosak.
Ennek jobb megértése érdekében vegye figyelembe az előző hipotetikus példát (vörösvértestek és baktériumok antigénei). Egyik esetben sem léteznek természetes ellenanyagok, de ha valaki ki van téve a baktériumoknak, akkor ellenanyagok fognak előállni.
Az ilyen antitestek később reagálnak a vörösvértestekkel szemben, ha a vörösvértesten lévő antigének nagyon hasonlóak azokhoz a baktériumokhoz, amelyek az ellenanyagok kialakulását indukálták.
Ha ez megtörténik, az adott antigénfehérjét tartalmazó vörösvérsejtek nem adhatók az ellenanyagokkal rendelkezőknek, mivel ez kilökődés lenne. Ebben rejlik a keresztreakciók fontossága.
Mi a keresztezés?
Mivel lehetetlen a különböző egyének vérét kisebb antigének alapján csoportosítani, az keresztmetszettel való áttekintés egyetlen módja annak megállapítására, hogy vannak-e egy másik személy vörösvérsejtjeinek kisebb antigénjeivel szemben antitestek..
Azokban az esetekben, amikor antitestek vannak jelen, hemolízis vagy agglutinációs reakció indul el, ezért lehet azt a következtetést levonni, hogy a reakció pozitív volt; tehát vannak antitestek a kisebb antigének ellen (bár nem ismert pontosan melyik). Ellenkező esetben a teszt negatív.
bázis
A keresztezettségek az antigén-antitest reakción alapulnak. Ezért velük meg lehet állapítani, hogy vannak-e antitestek a recipiens szérumában a donor vörösvértesteinek antigénjeivel szemben (vagy fordítva), ami antigén-antitest reakciót indukál.
Ha nincs antitest, akkor nem lép fel reakció, és a teszt negatív eredményt jelent. Éppen ellenkezőleg, ha a reakció pozitív (a teszt során hemolízis vagy agglutináció fordul elő), arra lehet következtetni, hogy antitestek vannak jelen.
Ebben az értelemben fontos megjegyezni, hogy a donor és a recipiens szérumában lehetnek vörösvértestek elleni antitestek. Ezért van kétféle keresztreakció.
A keresztreakciók típusai
A donor eritrociták elleni antitestek lehetnek a beteg szérumában; de fordítva is előfordulhat, vagyis a donor szérumában a páciens vörösvértesteivel szembeni ellenanyagok fordulhatnak elő.
Ezért létezik kétféle keresztmetszet:
- Nagyobb keresztmetszet.
- Kisebb keresztmetszet.
A vérkészítmények transzfúzióját megelőzően mindkét fajtát rutinszerűen végzik a vérbankban, mivel ha a tesztek bármelyike pozitív, akkor nagy a transzfúziós reakciók kockázata, amelyek veszélyeztethetik a beteg életét.
Major crossmatch
Ez a teszt megvizsgálja, hogy a recipiens széruma tartalmaz-e antitest a donor vörösvértesteivel szemben.
Ha ez történik, a vérkészítményeket nem lehet beadni, mivel a beteg plazmájában jelenlévő nagy mennyiségű antitest nagyon gyorsan elpusztítja a donor vörösvértesteit, katasztrofális reakciókat váltva ki a recipiens testében a folyamat során. Ezek a reakciók olyan súlyosak, hogy életveszélyesek lehetnek.
Kisebb keresztmetszet
Ebben az esetben meg kell határozni, hogy vannak-e antitestek a recipiens vörösvértesteivel szemben a donor szérumában.
Ha igen, az antitestek elkezdenek pusztítani a recipiens eritrocitáit. Mivel azonban az ellenanyagok mennyisége korlátozott, a reakció kevésbé intenzív; bár ez még mindig veszélyes.
fázisai
Mind a fő, mind a kisebb keresztmetszet három fázisra oszlik:
- Sóoldat.
- Termikus vagy inkubációs.
- Coombs.
Az első fázisban a vörösvértesteket és a szérumot sóoldatban összekeverik. Ezt követően albumint adunk hozzá, és a mintát 37 ° C-on inkubáljuk 30 percig, hogy végül folytassuk a koombs fázist.
Technika
A kereszt-illesztési technika viszonylag egyszerű, mivel magában foglalja a donor vörösvértestek hozzáadását a páciens szérumához (fő kereszt-illesztés), valamint a recipiens eritrocitákat a donor szérumába (kisebb kereszt-illesztés).
Annak érdekében, hogy az antigén-antitest reakció viszonylag rövid időn belül indukálódjon, egy sor szabványosított lépést kell követni. Ezeket a lépéseket az alábbiakban egyszerűsített módon foglaljuk össze.
Fontos megjegyezni, hogy a következő szakasz a fő kompatibilitási tesztet írja le, bár a lépések ugyanazok a kisebb kompatibilitási teszteknél, de a vörösvértestek és a szérum eredetének megosztása.
Sós fázis
- Adjunk egy kémcsőbe 2 csepp szérumot a recipienstől (a donortól, ha kisebb a keresztmetszet).
- Vegyen mintát a vörösvértestekből a donortól (a recipienstől, ha az kisebb keresztmetszet).
- Mossa le és centrifugálja a vörösvértesteket.
- Szuszpendáljuk 3% és 5% közötti oldatban.
- Helyezzen egy csepp oldatot a csőbe, amely a recipiens szérumát tartalmazza.
- Finoman keverje össze.
- Centrifuga.
- Olvassa el az eredményt a kijelző lámpájában.
Hőfázis
- Adjunk hozzá 2 csepp 22% -os albumint a csőbe, ahol a sós fázis befejeződött.
- Inkubáljuk 37 ° C-on 30 percig.
- Centrifugáljuk 15 másodpercig.
- Olvassa el az eredményt a kijelző lámpájában.
Coombs fázis
- Vegye ki a sejteket a csőből és mossuk sóoldattal.
- Távolítsuk el a felülúszót.
- Adjunk hozzá két csepp Coombs-reagenst.
- Finoman keverje össze.
- Centrifugáljuk 15-30 másodpercig.
- Szuszpendáljuk a sejteket, és értékeljük a néző lámpában agglutinációt vagy hemolízist.
Ha bármelyik fázisban agglutináció vagy hemolízis történik, az eredmény pozitívnak tekinthető.
Irodalom
- Hall, TC, Pattenden, C., Hollobone, C., Pollard, C., és Dennison, AR (2013). Vérátömlesztési politikák a választható általános műtét során: hogyan lehet optimalizálni a kereszt-egyezés és a transzfúzió arányát. Transzfúziós gyógyászat és hemoterápia, 40 (1), 27-31.
- Silvergleid, AJ, Wells, RF, Hafleigh, EB, Korn, G., Kellner, JJ, és Grumet, FC (1978). Kompatibilitási vizsgálat 51 krómmal jelölt vörösvértestekkel keresztmetszetben pozitív betegekben. Transzfúzió, 18 (1), 8-14.
- Kulkarni, N., Ali, M., Haray, PN, Joseph, A., és Masoud, A. (2006). Elektronikus keresztező rendszer. Szükség van-e a vér rutinszerű műtét előtti keresztezésére a kolorektális resekcióhoz? Endoszkópia, 38 (11), Poster_50.
- Heal, J. M., Blumberg, N., és Masel, D. (1987). A kereszteződés, a HLA és az ABO összeegyeztethetőségének értékelése a vérlemezke transzfúzió során a refrakter betegek között. Blood, 70 (1), 23-30.
- Arslan, Ö. (2006). Elektronikus keresztezés. Transzfúziós gyógyszer áttekintés, 20 (1), 75-79.
- Wu, KK, Hoak, JC, Koepke, JA, és Thompson, JS (1977). Kompatibilis vérlemezke donorok kiválasztása: három kereszt-egyezési módszer előrejelzése. Transfúzió, 17 (6), 638-643.
- Schonewille, H., Zijl, AMV és Wijermans, PW (2003). Az alacsony gyakoriságú RBC antigének elleni antitestek fontossága a teljes és rövidített kereszt - illesztésben. Transfúzió, 43 (7), 939-944.
