BAKTERIOLÓGIAI HUROK: JELLEMZŐK, TÍPUSOK, FELHASZNÁLÁSOK - BIOLÓGIA - 2025

A bakteriológiai hurok egy olyan eszköz, amelyet a mikrobiológusok használnak mikrobiális kultúrák (baktériumok vagy gombák) vetésére. Talán ez az eszköz, amelyet ezek a szakemberek a legjobban használnak.

Használata egyszerűnek tűnik, de a valóságban sok képzést igényel. A vetés megkezdése előtt a hurkot sterilizálni kell a Bunsen égőben, majd a folyékony tenyészetből vagy szilárd tenyészetből származó mikrobiális oltóanyagot veszik.

A bakteriológiai hurkok típusai. Forrás: A gép nem olvasható. ば や お feltételezve (szerzői jogi igények alapján).

Miután az oltóanyagot elvitték, folyékony közegben lerakhatják vagy szilárd közegbe bevethetik. Minden egyes eljárás után a hurkot ismét sterilizáljuk. A fogantyú mikrobás kenet elkészítésére is alkalmas a lemezen.

A bakteriológiai huroknak sok neve van, köztük platina hurok vagy hurok, oltási hurok vagy mag hurok, valódi neve azonban Kohle hurok.

Az anyag, amellyel a fogantyú készül, általában nikkel-króm (nikróm) ötvözet vagy platina. A piacon elérhető másik változat az eldobható műanyag bakteriológiai hurkok.

Másrészt többféle bakteriológiai hurok létezik, amelyek mindegyike egy funkciót lát el a mikrobiológus által végzett feladatok között. A fogantyú megválasztása attól függ, hogy mit kell tennie.

Például egy striatum kimerítésével történő elvégzéséhez a mikroorganizmus elkülönítése érdekében a platinahurkot használják, amely zárt gyűrűvel ér véget, függetlenül attól, hogy kalibrálva van-e vagy sem.

Míg vizeletminta vetésére van szükség, ahol fontos a CFU-k mennyiségi meghatározása, akkor a kalibrált hurkot kell használni. Hasonlóképpen, a tűhurok elengedhetetlen a biokémiai vizsgálatok beoltására, amelyeket szúrással kell bevetni. Fontos, hogy a fogantyút képzett személyzet kezelje.

jellemzők

A bakteriológiai hurkok két végletből állnak. Az egyik vége a fogantyúnak vagy az alapnak felel meg, a másik a maga fogantyújának felel meg.

Fogantyú alja vagy fogantyúja

Az alap megfogja a fogantyút kezelés közben. Ez általában fémből készült, de hőszigetelővel rendelkezik, amely megakadályozza a kezelő megégését, amikor a fogantyú hegyét az öngyújtón sterilizálják. Kb. 20 cm, bár hosszabb is lehet. Van egy menete a fogantyú beállításához.

Fogantyú

A funkcionális vége, azaz az a rész, amely érintkezésbe kerül a mikroorganizmusokkal és a tápközeggel. Finom huzalból áll, amelyet behelyeznek az alapba.

A fogantyú nikrómból vagy platinából készülhet, amelyet néha platina fogantyúnak hívnak. Körülbelül 6,5 cm hosszú, átmérője körülbelül 0,20 mm. A fogantyú fogantyúja 26,5 cm lehet. A mérések gyártónként változhatnak.

típusai

A bakteriológiai hurkok többféle típusa létezik, és mindegyikük külön felhasználásra kerül. A fogantyúk típusai a következők: kalibrált gyűrű alakú fogantyú, nem kalibrált gyűrű alakú fogantyú, egyenes vagy tűfogantyú, spatulatos fogantyú, „L” alakú fogantyú és éles hegyű fogantyú.

Másrészt a fogantyúk lehetnek állandóak vagy eldobhatóak. Az állandó felhasználásra szánt anyagokat az öngyújtóban sterilizálják, újrahasznosíthatóak és nagyon tartósak. Míg az eldobható cikkek sterilek a gyárból, csak egyszer használják fel és dobják el.

Alkalmazások

Gyűrűfogantyú, nincs kalibrálva

Ez a mikrobiológiai laboratóriumban a legelterjedtebb fogantyú. Arra szolgál, hogy egy mikrobiális szuszpenziót (folyékony táptalaj) vagy egy kolónia egy részét (szilárd táptalaj) oltják be, és egy másik tenyésztő tápközegbe oltják be, akár biokémiai tesztben, akár adott esetben dúsított vagy szelektív tápközegben. Hasznos mikrobás kenet elkészítésére dián.

Az ilyen típusú huroknál a kezdeti inokulum csíkos lehet. Azt is úgy tervezték, hogy simán csúszjon az agaron, anélkül, hogy megsértené. Természetesen ehhez képzett személyzetre van szükség a vetési technika kezeléséhez, a helyes erő és mozgások alkalmazásával, a jó vetés érdekében.

Különböző vetési technikák végezhetők ezzel a fogantyúval. Példa: a Petri-csészékben levő szilárd táptalajok általában kimerültséggel vetődnek be (számos módszer létezik, lásd az 1. videót).

Ennek a módszernek az a célja, hogy izolált kolóniákat nyújtson és megvizsgáljon és azonosítsa őket, különösen akkor, ha a minta polimikrobiális, azaz a tenyészet nem tiszta (egynél több mikroorganizmust tartalmaz).

Ehelyett az ékeket egy egyszerű cikcakkba ültetik a baktériumtömeg elérése érdekében, amelyre ebben az esetben nincs szükség a kolóniák elkülönítéséhez.

Időnként bizonyos mintákat vesznek. Például Rojas és munkatársai a bakteriológiai hurkot használják a lekapart hüvelyszövet minták gyűjtésére patkányokból.

Bakteriológiai hurok gyűrűs hegyével, nem kalibrálva. Forrás: Pixinio.com

Gyűrű alakú fogantyú, kalibrált

Ez a fogantyú, amint a neve is mutatja, úgy van kalibrálva, hogy egy meghatározott mennyiségű mikrobiális szuszpenziót vegyen fel. Ezt akkor használják, amikor az oltóanyagnak meg kell felelnie a szakterületen szabványosított követelményeknek.

Például nagyon gyakori a vizelettenyészet ültetése. Ebben az esetben 0,01 ml és 0,001 ml kalibrált hurok használható.

Meg kell jegyezni, hogy a kalibrált fogantyúk hibahatárral rendelkeznek, amely a minta vételi szögétől és a tartály szájának méretétől függ.

Ha a 0,001 ml-es hurkot függőlegesen egy kis szájú (≤ 7 mm) tartályba helyezik, akkor az alkalmazott mennyiség 50% -kal kevesebb lesz a kívántnál.

Ennek oka az, hogy minél kisebb a tartály szájának átmérője, annál nagyobb a felületi feszültség, és ezért az (üveg - folyadék) közötti tapadási erők növekednek. Ez csökkenti a fogantyú által felvett folyadék töltését.

Míg ha széles szájú (≥ 22 mm) tartályban 45 ° -os szöget vesznek be, akkor a szükséges mennyiség 150% -kal többet lehet begyűjteni. Ebben az esetben a felületi feszültség alacsonyabb, és az üveg / műanyag kohéziós erők csökkennek, miközben a folyadék-folyadék kohéziós erő növekszik.

A fentiek miatt a kolóniaképző egységek számszerűsítésének más módszerei néha előnyösek a vizelettenyészeteknél.

Egyenes vagy tűfogantyú

Ezt is szálfonónak nevezik. Egyes biokémiai vizsgálatok beoltására használják, különösen azokat, amelyeket a punkciós technika alkalmazásával be kell vetni. Példa félig szilárd közegekre, amelyeket blokk formájában állítunk elő, például: SIM, MIO és O / F közeg.

Ezen túlmenően a mozgékonyságot értékelő MIO és SIM esetén alapvető fontosságú, hogy a szúrást tűhurok segítségével végezzék el, mivel a pozitív motilitás értelmezése akkor fordul elő, amikor a baktériumok a kezdeti oltó oldalához növekednek.

A hurokhurokba oltott teszt hamisíthatja az eredményeket (hamis pozitív). Ezért az ilyen típusú vetésnél ügyelni kell arra, hogy a lyukasztás egyedi legyen, és eltávolításakor ugyanabba az irányba lépjen ki, ahova belépett.

Egy másik teszt, amelyet tűmaggal kell ellátni, annak ellenére, hogy ék alakban készül, a Kligler. Ebben a vizsgálatban nem javasolt, hogy az oxigén mélyen behatoljon az agarba, mivel bizonyos kémiai reakciókhoz oxigénszegény táptalajra van szükség. Ezt a fogantyút egy adott kolónia megérintésére is használják az altenyésztés céljából.

Spatulate fogantyú

A mikroorganizmusok többsége puha, könnyen szétszedhető telepeket eredményez. Vannak azonban olyan mikrobiális szerek, amelyek kolóniái kemények és szárazak, például általában a mikobaktériumok és néhány gombák. Ezekben az esetekben hasznos a spatulate fogantyú használata.

"L" alakú fogantyú

Leggyakrabban gombatenyésztések, különösen penészgombák felhasználására használják.

Éles hegy fogantyú

A polimikrobiális tenyészetekben nagyon kicsi kolóniák bevétele szempontjából hasznos, hogy képesek legyenek szubkultúrázni őket.

Vetési technikák

1. videó

A platina fogantyú sterilizálása

A fogantyút használat előtt és után sterilizálni kell. Az öngyújtóban lévő bakteriológiai hurok sterilizálásához az alábbiak szerint járjon el: a fogantyút a láng tetejére kell helyezni, a lehető legjobban függőleges helyzetbe helyezve oly módon, hogy felülről sterilezzen.

Amikor a finom szál izzóssá válik, azt mondhatjuk, hogy steril. Használatához lehűtjük és a kiválasztott mintát vesszük. (Lásd a 2. videót).

A bakteriológiai hurok sterilizálása

2. videó

Irodalom

1. "Bakteriológiai hurok" Wikipédia, a Ingyenes enciklopédia. 2019. július 23., 13:31 UTC. 2019. augusztus 18., 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Kalibrált fém fogantyúk mikrobiológusok számára: A nemzeti gyártás alternatívája. Soc. Gyere. Microbiol. 2010-ben; 30 (1): 37-42. Elérhető a: ve.scielo.org oldalon
3. Forbes B., Sahm D., Weissfeld A. (2009). Bailey és Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Szerkesztő Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiológiai diagnózis. 5. kiadás Szerkesztő Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M., Limón D, Luna F, et al. Az Eupatorium arsenei virágból származó hexán kivonat fájdalomcsillapító hatásának meghatározása patkányok akut fájdalommodelljében. mex. tudomány. Farm. 2015-ig; 46 (1): 64-69. Elérhető a scielo.org oldalon